HepG2、SMMC-7721、Hep3B、Huh-7肝癌細(xì)胞系培養(yǎng)合集

《細(xì)胞探險隊》旅程更新！繼 T（Jurkat、CTLL-2、MT-4、HuT-78）、 B（Raji、Daudi、Ramos、DB）淋巴細(xì)胞系、 單核-巨噬細(xì)胞系（Raw264.7、THP1、MH-S、J774A.1）、 NK細(xì)胞系（NK-92、NK-92MI、YT）、 成纖維細(xì)胞系（3T3-L1、3T6-Swiss albino、NCTC、HFF-1）、神經(jīng)腫瘤細(xì)胞系（SH-SY5Y、SK-N-AS、BT325、SHG-44）、乳腺癌細(xì)胞系培養(yǎng)合集（MCF7、T-47D、MDA-MB-231、ZR-75-1）后，這次探索的是肝癌細(xì)胞系！緊跟《細(xì)胞探險隊》，開啟細(xì)胞培養(yǎng)的奇妙之旅：覆蓋上百種細(xì)胞系，積累干貨經(jīng)驗(yàn)和技巧，讓細(xì)胞培養(yǎng)不再難！

Hep G2

01 名稱
Hep G2（人肝癌細(xì)胞）

02 別稱
HEP-G2;Hep G2;HEP G2;HepG2

03 簡介
該細(xì)胞系（HepG2）源于1975年一名15歲阿根廷男性肝癌患者的腫瘤組織。該細(xì)胞能產(chǎn)生甲胎蛋白、白蛋白、α2-巨球蛋白等多種蛋白質(zhì)，且能對人類生長激素的刺激做出反應(yīng)。

04 種屬
人

05 組織來源
肝

06 生長特性
貼壁細(xì)胞

07 細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣

08 應(yīng)用
藥物肝毒性評估、非病毒致肝癌機(jī)制探索、代謝性肝病模型構(gòu)建與機(jī)制研究

 圖片來源于ATCC

09 培養(yǎng)條件
（1）完全培養(yǎng)基配方：MEM（SH30265.01）＋ 10% FBS（SV30208.02）+1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C；
（3）氣相：5%CO2

10 換液頻率
2-3次/周

11 傳代周期
3-4天

12 傳代比例
1:4-1:6；建議接種密度2.0*10^4-6.0*10^4/ml

13 凍存液配方
95%完全培養(yǎng)基+5%DMSO（abs9187）或商品化細(xì)胞凍存液（130-129-552）

14 注意事項(xiàng)
（1） Hep G2細(xì)胞生長過慢甚至不生長，可將血清增加至15%-20%（不要超過20%），待細(xì)胞恢復(fù)生長速度后再將血清比例降低到10%。
（2） Hep G2細(xì)胞傳代或復(fù)蘇后有部分細(xì)胞漂浮是正常現(xiàn)象。細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁時間在24h左右，漂浮細(xì)胞較多時，可增加血清比例（不超過20%）促進(jìn)貼壁。
（3） Hep G2細(xì)胞在增殖過程中可能會看到有圓形細(xì)胞粘附在貼壁的單層細(xì)胞上，屬于正常現(xiàn)象，這些細(xì)胞可能是尚未完全貼壁或者正處于分裂期的細(xì)胞，如果細(xì)胞背景干凈無細(xì)胞碎片，可不用特殊處理。

SMMC-7721

01 名稱
SMMC-7721（人肝癌細(xì)胞）

02 別稱
SMMC7721

03 簡介
SMMC-7221是從一名50歲男性肝癌患者的手術(shù)切除標(biāo)本中建立的一株人肝癌細(xì)胞系。該細(xì)胞保留了一些肝癌相關(guān)的特征，但不分泌甲胎蛋白（AFP），常用于研究肝癌的增殖、凋亡、侵襲、遷移、血管生成等惡性生物學(xué)行為。

04 種屬
人

05 組織來源
肝

06 生長特性
貼壁細(xì)胞

07 細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣

08 應(yīng)用
HBV基因組整合驅(qū)動肝癌的機(jī)制探索、肝癌侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制、肝癌診斷標(biāo)志物的篩選與預(yù)后因子驗(yàn)證

圖片來源于參考文獻(xiàn)[1]

09 培養(yǎng)條件
（1）完全培養(yǎng)基配方：RPMI-1640（SH30809.01）+10%FBS（SV30208.02）+1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C
（3）CO2：5%CO2

10 換液頻率
2-3次/周 

11 傳代周期
3-4天

12 傳代比例
1:3-1:5

13 凍存液配方
90%FBS+10%DMSO（abs9187-100mL）或商品化細(xì)胞凍存液（130-129-552）

14 注意事項(xiàng)
（1） 部分SMMC-7721細(xì)胞在傳代多次或血清誘導(dǎo)下，可能表現(xiàn)出神經(jīng)元樣分化，出現(xiàn)觸角狀突起。如果實(shí)驗(yàn)不需要分化細(xì)胞，應(yīng)注意避免此現(xiàn)象。
（2） SMMC-7721細(xì)胞對血清依賴性較高，無血清培養(yǎng)時生長緩慢且易分化，通常不建議無血清培養(yǎng)。若有實(shí)驗(yàn)特殊需求，則需額外在無血清培養(yǎng)基中添加生長因子如 EGF、胰島素。

Hep3B

01 名稱
Hep 3B（人肝癌細(xì)胞）

02 別稱
Hep 3B2_1-7;Hep 3B2 ; Hep-3B

03 簡介
Hep 3B細(xì)胞是來自8歲黑人男孩的肝癌腫瘤組織。該細(xì)胞的染色體模式數(shù)目為60，在裸鼠中能致瘤， 且能產(chǎn)生甲胎蛋白（alpha-fetoprotein)、乙肝表面抗原（BHsAg)、白蛋白、巨球蛋白、α-抗胰蛋白酶（alphal-antitrypsin)、轉(zhuǎn)鐵蛋白等，具有廣泛的研究價值。

04 種屬
人

05 組織來源
肝細(xì)胞癌；肝

06 生長特性
貼壁細(xì)胞

07 細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣

08 應(yīng)用
肝癌相關(guān)基因突變功能驗(yàn)證；肝癌轉(zhuǎn)移相關(guān)通路研究和體內(nèi)轉(zhuǎn)移模型構(gòu)建

圖片來源于中國科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會細(xì)胞庫

09 培養(yǎng)條件
（1）完全培養(yǎng)基配方：MEM(含NEAA)（SH30243.01）＋10% FBS（SV30208.02）+1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C
（3）培養(yǎng)箱氣體：95%空氣，5%CO₂ 

10 換液頻率
2-3次/周

11 傳代比例
1:4-1:6；建議接種密度5*10^5-8*10^5/ml

12 凍存液配方
95%完全培養(yǎng)基 +5%DMSO（abs9187-100mL）或商品化細(xì)胞凍存液（130-129-552）

13 注意事項(xiàng)
（1） Hep3B細(xì)胞含有乙型肝炎病毒（HBV），在解凍該細(xì)胞時，務(wù)必穿著個人防護(hù)裝備（PPE），必要時使用生物安全柜，避免接觸性感染，降低病毒暴露風(fēng)險。
（2） Hep3B細(xì)胞在消化時極易受損，消化時間需嚴(yán)格控制，一般消化到細(xì)胞明顯回縮、間隙變大但未完全脫落時，加入完全培養(yǎng)基終止消化。若消化過度，可能導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)異常、生長速度減慢甚至無法繼續(xù)傳代。
（3） Hep3B細(xì)胞貼壁能力較弱，因此在遇到運(yùn)輸?shù)蜏丶罢鹗�、室溫靜置太長時間、添加的培養(yǎng)基或其他試劑過冷等情況時會出現(xiàn)明顯的細(xì)胞回縮變粗變短的現(xiàn)象，及時放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)后可恢復(fù)正常。

Huh-7

01 名稱
Huh-7（人肝癌細(xì)胞）

02 別稱
HuH-7;Huh7;JTC-39;Japanese Tissue Culture-39

03 簡介
Huh-7細(xì)胞是從一名 57 歲日本男性肝癌患者的肝腫瘤組織中分離獲得，目前用于體外研究丙型肝炎病毒(HCV)和登革熱病毒的細(xì)胞模型。

04 種屬
人

05 組織來源
肝臟、膽囊

06 生長特性
貼壁生長

07 細(xì)胞形態(tài)
上皮樣細(xì)胞

08 應(yīng)用
HCV 病毒學(xué)研究及抗肝癌/抗 HCV 藥物研發(fā)領(lǐng)域研究、聚焦非HBV肝癌發(fā)病機(jī)制研究、肝癌的基因治療和免疫治療

圖片來源于中國科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會細(xì)胞庫

09 培養(yǎng)條件
（1）完全培養(yǎng)基配方：DMEM高糖（SH30243.01）＋10% FBS（SV30208.02）+1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C
（3）CO₂ ：5%

10 換液頻率
2-3次/周

11 傳代比例
1:2-1:4

12 凍存液配方
90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO（abs9187-100mL）或商品化細(xì)胞凍存液（130-129-552）

13 注意事項(xiàng)
（1）Huh-7細(xì)胞有觸角/偽足，屬于正常現(xiàn)象，無需過度干預(yù)。
（2）Huh-7細(xì)胞中有黑色顆粒，為細(xì)胞器、細(xì)胞內(nèi)囊泡或其他胞內(nèi)物質(zhì)，屬于細(xì)胞自身特性。背景中也有少量黑色顆粒，為細(xì)胞碎片。少量碎片不影響細(xì)胞生長，若碎片較多，可以吸走培養(yǎng)基后用預(yù)熱的PBS輕輕潤洗1-2遍。
（3）如有特殊實(shí)驗(yàn)需求，Huh-7細(xì)胞可以進(jìn)行無血清培養(yǎng)，會在培養(yǎng)基內(nèi)分泌許多血清蛋白和alpha phyto蛋白。

參考資料:
ATCC官網(wǎng)
中國科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會細(xì)胞庫

參考文獻(xiàn):
[1] Wang QL, Liu BO, Li XJ, Hu KP, Zhao K, Ye XM. Inhibition of mTOR promotes hyperthermia sensitivity in SMMC-7721 human hepatocellular carcinoma cell line. Exp Ther Med. 2016;11(3):961-968. doi:10.3892/etm.2016.2979.