HCT116、HT-29、SW620、LoVo結腸癌細胞系培養(yǎng)合集

《細胞探險隊》旅程更新！繼T（Jurkat、CTLL-2、MT-4、HuT-78）、B（Raji、Daudi、Ramos、DB）淋巴細胞系、單核-巨噬細胞系（Raw264.7、THP1、MH-S、J774A.1）、NK細胞系（NK-92、NK-92MI、YT）、成纖維細胞系（3T3-L1、3T6-Swiss albino、NCTC、HFF-1）、神經(jīng)腫瘤細胞系（SH-SY5Y、SK-N-AS、BT325、SHG-44）、乳腺癌細胞系培養(yǎng)合集（MCF7、T-47D、MDA-MB-231、ZR-75-1）、肝癌細胞系培養(yǎng)合集（HepG2、SMMC-7721、Hep3B、Huh-7）后，這次探索的是結腸癌細胞系！緊跟《細胞探險隊》，開啟細胞培養(yǎng)的奇妙之旅：覆蓋上百種細胞系，積累干貨經(jīng)驗和技巧，讓細胞培養(yǎng)不再難。

HCT116

01 名稱
HCT116（人結腸癌腫瘤細胞）

02 別稱
HCT-116; HCT.116; HCT_116

03 簡介
HCT116細胞是1979年Brattain M等人從患結腸癌的男性病人中分離建系的3株細胞之一。該細胞在RAS原癌基因第13密碼子上發(fā)生突變，并且在裸鼠中具有致瘤性。

04 種屬
人

05 組織來源
結腸

06 生長特性
貼壁細胞

07 細胞形態(tài)
上皮細胞樣

08 應用
腫瘤微環(huán)境互作機制解析；腫瘤侵襲、轉移及上皮-間質轉化（EMT）研究；結腸癌藥物篩選以及波形蛋白中間絲動態(tài)研究

圖片來源于中國科學院典型培養(yǎng)物保藏委員會細胞庫

09 培養(yǎng)條件
（1）完全培養(yǎng)基配方：McCoy's 5A（SH30270.01）＋ 10% FBS（SV30208.02）+1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C；
（3）氣相：5%CO2

10 換液頻率
2-3次/周

11 傳代周期
3-4天

12 傳代比例
1:3-1:8；建議接種密度2×10⁴-4×10⁴個/cm²

13 凍存液配方
90%完全培養(yǎng)基+10%DMSO（abs9187）或商品化細胞凍存液（130-129-552）

14 注意事項
（1） HCT116為上皮樣貼壁細胞，呈多邊形，排列規(guī)則，若出現(xiàn)大量梭形細胞（可能發(fā)生 EMT）或大小不一的細胞（可能出現(xiàn)異質性增殖），需及時更換為凍存的早期代數(shù)細胞。
（2） HCT116細胞貼壁不牢固，輕微晃動培養(yǎng)瓶即可見大量圓形、透亮的細胞從瓶底脫落懸浮于培養(yǎng)液中。這是HCT116的正�，F(xiàn)象，并非全部是死細胞。在換液或傳代時，切勿將這些懸浮細胞全部棄去。
（3） HCT116使用McCoy's 5A基礎培養(yǎng)基，但部分研究提及DMEM高糖培養(yǎng)基也可使用，但需遵循細胞株來源的推薦培養(yǎng)基類型，避免隨意更換。

HT-29

01 名稱
HT-29（人結腸癌細胞） 

02 別稱
HT 29; HT29

03 簡介
HT-29細胞于1964年從一名患結直腸癌的44歲白人女性的原發(fā)腫瘤中分離獲得。該細胞過表達p53 基因，且在 273 密碼子處有 G->A 突變。此外，HT-29細胞可在裸鼠體內(nèi)成瘤，也能在類固醇處理的地鼠成瘤。

04 種屬
人

05 組織來源
結腸

06 生長特性
貼壁細胞

07 細胞形態(tài)
上皮細胞樣

08 應用
腸道上皮分化與癌變關聯(lián)研究、CRC 臨床前藥物研發(fā)的核心工具、腸道生理與病理模型構建（體外“腸模擬”）

圖片來源于ATCC

09 培養(yǎng)條件
（1）完全培養(yǎng)基配方：McCoy's 5A（SH30270.01）＋ 10% FBS（SV30208.02）+1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C
（3）CO2：5%CO2

10 換液頻率
2-3次/周 

11 傳代周期
3-4天

12 傳代比例
1:3-1:8

13 凍存液配方
90%FBS+10%DMSO（abs9187-100mL）或商品化細胞凍存液（130-129-552）

14 注意事項
（1） HT-29細胞的基礎培養(yǎng)基優(yōu)先選用McCoy's 5A 培養(yǎng)基（最適合維持HT-29的高分化特性），不可隨意替換為DMEM或RPMI 1640（易導致細胞分化狀態(tài)改變、形態(tài)異常）。
（2） 當HT-29細胞融合度達到70%-80%左右就可進行傳代，融合度過高會導致細胞分化加劇，出現(xiàn)空泡化；過低會影響增殖效率。
（3） HT-29細胞連接較緊密，需要比HCT116更充分的吹打才能形成單細胞懸液，但仍需避免暴力操作產(chǎn)生氣泡。
（4） HT-29既是癌細胞，也是腸道上皮分化的模型。可根據(jù)您的實驗目的決定培養(yǎng)策略：低匯合度維持增殖，高匯合度/誘導劑促進分化。

SW620

01 名稱
SW620（人結腸腺癌細胞）

02 別稱
SW-620; SW 620; SW.620

03 簡介
SW620細胞是從一名 51 歲白人男性的大腸組織中分離出來的。該細胞主要由無絨毛的小園球細胞和雙極細胞組成，僅合成少量癌胚抗原（CEA）且在裸鼠中有高度的致瘤性。

04 種屬
人

05 組織來源
結腸，轉移位置：淋巴結

06 生長特性
貼壁細胞

07 細胞形態(tài)
上皮細胞樣

08 應用
結直腸癌轉移相關基因/通路的篩選與驗證、抗轉移藥物研發(fā)與耐藥研究、體內(nèi)轉移模型構建與預后標志物驗證

圖片來源于中國科學院典型培養(yǎng)物保藏委員會細胞庫

09 培養(yǎng)條件
（1）完全培養(yǎng)基配方：Leibovitz's L-15（SH30525.01）＋10% FBS（SV30208.02）+1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C
（3）培養(yǎng)箱氣體：100%空氣

10 換液頻率
2-3次/周

11 傳代比例
1:2-1:10

12 凍存液配方
95%完全培養(yǎng)基 +5%DMSO（abs9187-100mL）或商品化細胞凍存液（130-129-552）

13 注意事項
（1） SW620基礎培養(yǎng)基為 Leibovitz's L-15， 需在37℃、100% 空氣（無 CO₂）的飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，嚴禁通入CO₂空氣混合氣體，CO₂會破壞培養(yǎng)基的pH，導致 pH 值驟降（＜6.8），24小時內(nèi)即可引發(fā)細胞皺縮、貼壁能力下降甚至死亡。
（2） SW620細胞貼壁能力較強，因此消化時間較長，在顯微鏡下看到細胞間隙增大，大部分細胞變圓、部分開始脫落時，即可終止消化。此外，SW620細胞懸浮較少，如果在換液時看到大量懸浮細胞，則細胞狀態(tài)不佳或存在污染。
（3） 由于SW620細胞連接緊密、貼壁牢固，解離時需要更用力地吹打細胞表面，才能將其完全吹散成單細胞懸液，但需避免產(chǎn)生過多氣泡。

LoVo

01 名稱
LoVo（人結腸癌細胞）

02 別稱
LOVO

03 簡介
LoVo細胞于1971年建系，來源于一名56歲白人男性結直腸癌患者的左鎖骨上區(qū)腫瘤轉移灶。該細胞腫瘤基因C-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis和fos表達陽性，且表達腫瘤特定的核基質蛋白CC-3和CC-4，可在裸鼠體中成瘤。

04 種屬
人

05 組織來源
結腸，轉移位置：左鎖骨上區(qū)

06 生長特性
貼壁生長

07 細胞形態(tài)
上皮樣細胞

08 應用
探索聯(lián)合治療策略、免疫逃逸機制研究、篩選早期診斷標志物、藥物敏感性及耐藥機制研究

圖片來源于ATCC

09 培養(yǎng)條件
（1）完全培養(yǎng)基配方：Ham‘s F-12K（abs9563）＋10% FBS（SV30208.02）+1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C
（3）CO₂ ：5%

10 換液頻率
2-3次/周

11 傳代比例
1:3-1:10

12 凍存液配方
95% 完全培養(yǎng)基+5% DMSO（abs9187-100mL）或商品化細胞凍存液（130-129-552）

13 注意事項
（1）LoVo細胞同時以貼壁和懸浮單細胞/團塊兩種形式存在，這是LoVo細胞的固有特性，而非培養(yǎng)不當或污染的表現(xiàn)，任何操作都必須同時兼顧這兩部分細胞。
（2）貼壁生長的LoVo細胞并非均勻的單層細胞，而是形成三維的、貼壁不牢固的細胞“集落”，這些“集落”很容易在晃動或吹打時脫落變?yōu)閼腋�狀態(tài)。
（3）LoVo細胞消化時，在顯微鏡下觀察，當貼壁細胞集落變得松散、有脫離表面的趨勢時即可終止。不需要消化成完全的單細胞，保持小團塊狀態(tài)更利于其生長。

參考資料:
ATCC官網(wǎng)
中國科學院典型培養(yǎng)物保藏委員會細胞庫