HCT116、HT-29、SW620、LoVo結(jié)腸癌細(xì)胞系培養(yǎng)合集

《細(xì)胞探險(xiǎn)隊(duì)》旅程更新！繼T（Jurkat、CTLL-2、MT-4、HuT-78）、B（Raji、Daudi、Ramos、DB）淋巴細(xì)胞系、單核-巨噬細(xì)胞系（Raw264.7、THP1、MH-S、J774A.1）、NK細(xì)胞系（NK-92、NK-92MI、YT）、成纖維細(xì)胞系（3T3-L1、3T6-Swiss albino、NCTC、HFF-1）、神經(jīng)腫瘤細(xì)胞系（SH-SY5Y、SK-N-AS、BT325、SHG-44）、乳腺癌細(xì)胞系培養(yǎng)合集（MCF7、T-47D、MDA-MB-231、ZR-75-1）、肝癌細(xì)胞系培養(yǎng)合集（HepG2、SMMC-7721、Hep3B、Huh-7）后，這次探索的是結(jié)腸癌細(xì)胞系！緊跟《細(xì)胞探險(xiǎn)隊(duì)》，開啟細(xì)胞培養(yǎng)的奇妙之旅：覆蓋上百種細(xì)胞系，積累干貨經(jīng)驗(yàn)和技巧，讓細(xì)胞培養(yǎng)不再難。

HCT116

01 名稱
HCT116（人結(jié)腸癌腫瘤細(xì)胞）

02 別稱
HCT-116; HCT.116; HCT_116

03 簡(jiǎn)介
HCT116細(xì)胞是1979年Brattain M等人從患結(jié)腸癌的男性病人中分離建系的3株細(xì)胞之一。該細(xì)胞在RAS原癌基因第13密碼子上發(fā)生突變，并且在裸鼠中具有致瘤性。

04 種屬
人

05 組織來(lái)源
結(jié)腸

06 生長(zhǎng)特性
貼壁細(xì)胞

07 細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣

08 應(yīng)用
腫瘤微環(huán)境互作機(jī)制解析；腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）研究；結(jié)腸癌藥物篩選以及波形蛋白中間絲動(dòng)態(tài)研究

圖片來(lái)源于中國(guó)科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì)細(xì)胞庫(kù)

09 培養(yǎng)條件
（1）完全培養(yǎng)基配方：McCoy's 5A（SH30270.01）＋ 10% FBS（SV30208.02）+1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C；
（3）氣相：5%CO2

10 換液頻率
2-3次/周

11 傳代周期
3-4天

12 傳代比例
1:3-1:8；建議接種密度2×10⁴-4×10⁴個(gè)/cm²

13 凍存液配方
90%完全培養(yǎng)基+10%DMSO（abs9187）或商品化細(xì)胞凍存液（130-129-552）

14 注意事項(xiàng)
（1） HCT116為上皮樣貼壁細(xì)胞，呈多邊形，排列規(guī)則，若出現(xiàn)大量梭形細(xì)胞（可能發(fā)生 EMT）或大小不一的細(xì)胞（可能出現(xiàn)異質(zhì)性增殖），需及時(shí)更換為凍存的早期代數(shù)細(xì)胞。
（2） HCT116細(xì)胞貼壁不牢固，輕微晃動(dòng)培養(yǎng)瓶即可見大量圓形、透亮的細(xì)胞從瓶底脫落懸浮于培養(yǎng)液中。這是HCT116的正常現(xiàn)象，并非全部是死細(xì)胞。在換液或傳代時(shí)，切勿將這些懸浮細(xì)胞全部棄去。
（3） HCT116使用McCoy's 5A基礎(chǔ)培養(yǎng)基，但部分研究提及DMEM高糖培養(yǎng)基也可使用，但需遵循細(xì)胞株來(lái)源的推薦培養(yǎng)基類型，避免隨意更換。

HT-29

01 名稱
HT-29（人結(jié)腸癌細(xì)胞） 

02 別稱
HT 29; HT29

03 簡(jiǎn)介
HT-29細(xì)胞于1964年從一名患結(jié)直腸癌的44歲白人女性的原發(fā)腫瘤中分離獲得。該細(xì)胞過(guò)表達(dá)p53 基因，且在 273 密碼子處有 G->A 突變。此外，HT-29細(xì)胞可在裸鼠體內(nèi)成瘤，也能在類固醇處理的地鼠成瘤。

04 種屬
人

05 組織來(lái)源
結(jié)腸

06 生長(zhǎng)特性
貼壁細(xì)胞

07 細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣

08 應(yīng)用
腸道上皮分化與癌變關(guān)聯(lián)研究、CRC 臨床前藥物研發(fā)的核心工具、腸道生理與病理模型構(gòu)建（體外“腸模擬”）

圖片來(lái)源于ATCC

09 培養(yǎng)條件
（1）完全培養(yǎng)基配方：McCoy's 5A（SH30270.01）＋ 10% FBS（SV30208.02）+1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C
（3）CO2：5%CO2

10 換液頻率
2-3次/周 

11 傳代周期
3-4天

12 傳代比例
1:3-1:8

13 凍存液配方
90%FBS+10%DMSO（abs9187-100mL）或商品化細(xì)胞凍存液（130-129-552）

14 注意事項(xiàng)
（1） HT-29細(xì)胞的基礎(chǔ)培養(yǎng)基優(yōu)先選用McCoy's 5A 培養(yǎng)基（最適合維持HT-29的高分化特性），不可隨意替換為DMEM或RPMI 1640（易導(dǎo)致細(xì)胞分化狀態(tài)改變、形態(tài)異常）。
（2） 當(dāng)HT-29細(xì)胞融合度達(dá)到70%-80%左右就可進(jìn)行傳代，融合度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞分化加劇，出現(xiàn)空泡化；過(guò)低會(huì)影響增殖效率。
（3） HT-29細(xì)胞連接較緊密，需要比HCT116更充分的吹打才能形成單細(xì)胞懸液，但仍需避免暴力操作產(chǎn)生氣泡。
（4） HT-29既是癌細(xì)胞，也是腸道上皮分化的模型�？筛鶕�(jù)您的實(shí)驗(yàn)?zāi)康臎Q定培養(yǎng)策略：低匯合度維持增殖，高匯合度/誘導(dǎo)劑促進(jìn)分化。

SW620

01 名稱
SW620（人結(jié)腸腺癌細(xì)胞）

02 別稱
SW-620; SW 620; SW.620

03 簡(jiǎn)介
SW620細(xì)胞是從一名 51 歲白人男性的大腸組織中分離出來(lái)的。該細(xì)胞主要由無(wú)絨毛的小園球細(xì)胞和雙極細(xì)胞組成，僅合成少量癌胚抗原（CEA）且在裸鼠中有高度的致瘤性。

04 種屬
人

05 組織來(lái)源
結(jié)腸，轉(zhuǎn)移位置：淋巴結(jié)

06 生長(zhǎng)特性
貼壁細(xì)胞

07 細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣

08 應(yīng)用
結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因/通路的篩選與驗(yàn)證、抗轉(zhuǎn)移藥物研發(fā)與耐藥研究、體內(nèi)轉(zhuǎn)移模型構(gòu)建與預(yù)后標(biāo)志物驗(yàn)證

圖片來(lái)源于中國(guó)科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì)細(xì)胞庫(kù)

09 培養(yǎng)條件
（1）完全培養(yǎng)基配方：Leibovitz's L-15（SH30525.01）＋10% FBS（SV30208.02）+1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C
（3）培養(yǎng)箱氣體：100%空氣

10 換液頻率
2-3次/周

11 傳代比例
1:2-1:10

12 凍存液配方
95%完全培養(yǎng)基 +5%DMSO（abs9187-100mL）或商品化細(xì)胞凍存液（130-129-552）

13 注意事項(xiàng)
（1） SW620基礎(chǔ)培養(yǎng)基為 Leibovitz's L-15， 需在37℃、100% 空氣（無(wú) CO₂）的飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，嚴(yán)禁通入CO₂空氣混合氣體，CO₂會(huì)破壞培養(yǎng)基的pH，導(dǎo)致 pH 值驟降（＜6.8），24小時(shí)內(nèi)即可引發(fā)細(xì)胞皺縮、貼壁能力下降甚至死亡。
（2） SW620細(xì)胞貼壁能力較強(qiáng)，因此消化時(shí)間較長(zhǎng)，在顯微鏡下看到細(xì)胞間隙增大，大部分細(xì)胞變圓、部分開始脫落時(shí)，即可終止消化。此外，SW620細(xì)胞懸浮較少，如果在換液時(shí)看到大量懸浮細(xì)胞，則細(xì)胞狀態(tài)不佳或存在污染。
（3） 由于SW620細(xì)胞連接緊密、貼壁牢固，解離時(shí)需要更用力地吹打細(xì)胞表面，才能將其完全吹散成單細(xì)胞懸液，但需避免產(chǎn)生過(guò)多氣泡。

LoVo

01 名稱
LoVo（人結(jié)腸癌細(xì)胞）

02 別稱
LOVO

03 簡(jiǎn)介
LoVo細(xì)胞于1971年建系，來(lái)源于一名56歲白人男性結(jié)直腸癌患者的左鎖骨上區(qū)腫瘤轉(zhuǎn)移灶。該細(xì)胞腫瘤基因C-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis和fos表達(dá)陽(yáng)性，且表達(dá)腫瘤特定的核基質(zhì)蛋白CC-3和CC-4，可在裸鼠體中成瘤。

04 種屬
人

05 組織來(lái)源
結(jié)腸，轉(zhuǎn)移位置：左鎖骨上區(qū)

06 生長(zhǎng)特性
貼壁生長(zhǎng)

07 細(xì)胞形態(tài)
上皮樣細(xì)胞

08 應(yīng)用
探索聯(lián)合治療策略、免疫逃逸機(jī)制研究、篩選早期診斷標(biāo)志物、藥物敏感性及耐藥機(jī)制研究

圖片來(lái)源于ATCC

09 培養(yǎng)條件
（1）完全培養(yǎng)基配方：Ham‘s F-12K（abs9563）＋10% FBS（SV30208.02）+1%雙抗（SV30010）
（2）溫度：37°C
（3）CO₂ ：5%

10 換液頻率
2-3次/周

11 傳代比例
1:3-1:10

12 凍存液配方
95% 完全培養(yǎng)基+5% DMSO（abs9187-100mL）或商品化細(xì)胞凍存液（130-129-552）

13 注意事項(xiàng)
（1）LoVo細(xì)胞同時(shí)以貼壁和懸浮單細(xì)胞/團(tuán)塊兩種形式存在，這是LoVo細(xì)胞的固有特性，而非培養(yǎng)不當(dāng)或污染的表現(xiàn)，任何操作都必須同時(shí)兼顧這兩部分細(xì)胞。
（2）貼壁生長(zhǎng)的LoVo細(xì)胞并非均勻的單層細(xì)胞，而是形成三維的、貼壁不牢固的細(xì)胞“集落”，這些“集落”很容易在晃動(dòng)或吹打時(shí)脫落變?yōu)閼腋�狀態(tài)。
（3）LoVo細(xì)胞消化時(shí)，在顯微鏡下觀察，當(dāng)貼壁細(xì)胞集落變得松散、有脫離表面的趨勢(shì)時(shí)即可終止。不需要消化成完全的單細(xì)胞，保持小團(tuán)塊狀態(tài)更利于其生長(zhǎng)。

參考資料:
ATCC官網(wǎng)
中國(guó)科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì)細(xì)胞庫(kù)