多克隆抗體測序的優(yōu)勢及挑戰(zhàn)

什么是多克隆抗體？

多克隆抗體（polyclonal antibodies, pAbs）是由異質(zhì)性B細(xì)胞群體產(chǎn)生的抗體混合物，能夠識(shí)別抗原表面的多個(gè)不同表位，因而具備多特異性特征[1]。相比之下，單克隆抗體（monoclonal antibodies, mAbs）來源于單一B細(xì)胞克隆，僅針對抗原的某一特定表位，展現(xiàn)出高度單一特異性[2]。

多克隆抗體相對于單克隆抗體的優(yōu)勢有哪些？

多克隆抗體的優(yōu)勢在于其能夠同時(shí)識(shí)別抗原的多個(gè)表位，在抗原表位信息不完整或抗原存在高度異質(zhì)性的研究場景中，表現(xiàn)出更優(yōu)的抗原捕獲能力和檢測靈敏度。這一特性使其在臨床初步篩查、早期診斷及基礎(chǔ)研究領(lǐng)域具有不可替代的價(jià)值[3]。此外，多克隆抗體兼具生產(chǎn)成本優(yōu)勢和靈敏檢測特性，使其在免疫印跡（Western Blot）和免疫沉淀（Immunoprecipitation）等關(guān)鍵技術(shù)中得到廣泛應(yīng)用。

多克隆抗體目前遇到的挑戰(zhàn)有哪些？

多克隆抗體制備過程中的核心挑戰(zhàn)在于批次間差異性，其根源在于免疫動(dòng)物的個(gè)體生物學(xué)差異，包括遺傳背景、免疫狀態(tài)及健康狀況等因素。盡管通過標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)流程可在一定程度上降低工藝帶來的相關(guān)變異，但無法完全消除生物體固有差異所導(dǎo)致的質(zhì)量波動(dòng)。因此，從多克隆抗體庫中篩選獲得高特異性、高靈敏度的單克隆抗體具有重要的產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化價(jià)值。如圖所示，在Western blot分析中，多克隆抗體與DDA-BSA結(jié)合物反應(yīng)呈現(xiàn)多個(gè)條帶，證實(shí)其多表位識(shí)別特性；而單克隆抗體僅顯示單一顯著條帶，體現(xiàn)了其高度特異性[4]。

綜上所述，盡管多克隆抗體在成本效益和多表位識(shí)別方面具有獨(dú)特優(yōu)勢，但其批次間差異性仍是限制其應(yīng)用的顯著瓶頸。為提升抗體檢測的準(zhǔn)確性與結(jié)果可重復(fù)性，從多克隆抗體中定向篩選和開發(fā)高特異性單克隆抗體已成為行業(yè)共識(shí)，這一趨勢也顯著推動(dòng)了抗體工程技術(shù)創(chuàng)新與臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用的快速發(fā)展[5]。

什么是多克隆抗體測序？

BSI / 百蓁生物多克隆抗體測序是一種基于質(zhì)譜從頭測序、AI數(shù)據(jù)解析等多技術(shù)發(fā)現(xiàn)平臺(tái)，能夠從復(fù)雜抗體樣本中精準(zhǔn)獲取單克隆抗體的完整序列信息的技術(shù)。該技術(shù)依托AI質(zhì)譜驅(qū)動(dòng)，可高效鑒定高特異性、高活性的單克隆序列，從而徹底解決多克隆抗體批次間的一致性問題，顯著提升實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。

多克隆抗體測序的應(yīng)用場景有哪些？

1.生物藥研發(fā)

2.體外診斷試劑開發(fā)

3.多抗轉(zhuǎn)化成單抗或者單抗混合物

多克隆抗體測序有哪些優(yōu)勢？

01  更直接：

直接從樣本中精準(zhǔn)獲取單克隆抗體完整序列

02  更精準(zhǔn)：

AI質(zhì)譜結(jié)合蛋白從頭測序等多種先進(jìn)技術(shù)，確保序列的100%準(zhǔn)確，提升實(shí)驗(yàn)的高重復(fù)性。

03  更節(jié)省：

可實(shí)現(xiàn)無動(dòng)物體外生產(chǎn)，同時(shí)明顯提高產(chǎn)品的批間一致性和生產(chǎn)規(guī)模，更節(jié)省成本支出。

04  更快速：

最快一個(gè)月拿到單克隆抗體序列信息，通過體外的大規(guī)模表達(dá)純化，大大縮短研發(fā)和生產(chǎn)周期

BSI / 百蓁生物多克隆抗體測序技術(shù)流程

BSI / 百蓁生物提供基于AI質(zhì)譜的一站式多克隆抗體測序發(fā)現(xiàn)服務(wù)

送樣要求：

●新鮮脾臟組織1只（鼠或兔）或 1-5mL全血 或 2e⁶-1e⁷ 新鮮提取的PBMC細(xì)胞

●0.1mg以上抗原特異性多抗溶液（1ug/uL以上)

●1mg高純度抗原

交付標(biāo)準(zhǔn)&服務(wù)周期：

●100%覆蓋高可信的完整抗體可變區(qū)序列 （5個(gè)以上）（1-1.5個(gè)月）

●100%覆蓋高可信有活性的完整抗體序列 （5個(gè)以上）（2-2.5個(gè)月）

●100%覆蓋高可信有活性的100mg單克隆抗體（5個(gè)以上 ）（2.5-3個(gè)月）

成功案例

Y蛋白兔多克隆抗體中高特異性單克隆抗體發(fā)現(xiàn)

Y蛋白作為抗原免疫新西蘭大白兔后，獲得高特異性多克隆抗體，同時(shí)獲取全血PBMC測序獲得BCR序列模版。使用我司AI驅(qū)動(dòng)多抗發(fā)現(xiàn)平臺(tái)提供的抗體發(fā)現(xiàn)和活性驗(yàn)證全流程服務(wù)后，獲得3個(gè)高活性的單克隆抗體。ELISA實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其中ab5具有與原多抗相似的親和力，WESTERN-BLOT實(shí)驗(yàn)確證該單克隆抗體特異性明顯優(yōu)于原始多克隆抗體。

參考文獻(xiàn)

[1] Tran N H , Zhang X , Xin L ,et al.De novo peptide sequencing by deep learning[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2017, 114(31):201705691.DOI:10.1073/pnas.1705691114.

[2] Zeping M , Ruixue Z , Ming L L .Mitigating the missing-fragmentation problem in de novo peptide sequencing with a two-stage graph-based deep learning model[J].Nature Machine Intelligence, 2023, 5(11):1250-1260.DOI:10.1038/s42256-023-00738-x.

[3] Li, K., Shan, B., Xin, L. et al. Proteoform search from protein database with top-down mass spectra. Nat Comput Sci (2025). doi.org/10.1038/s43588-025-00880-z

[4] Xin L, Li W, Zhang S, Tran NH, Chen Z, Ma J, Peng C, Aihemaiti A, Hoffman K, Zhang X, Sun W, Li L, Wang Z, Li M, Shan B. Sequencing of Polyclonal Antibodies by Integrating Intact Mass, Middle-Down and De Novo Bottom-Up Mass Spectrometry. Mol Cell Proteomics. 2025 Oct 13:101088. doi: 10.1016/j.mcpro.2025.101088. Epub ahead of print. PMID: 41093274.