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Luminex液相芯片技術(shù)的原理、操作流程、優(yōu)勢及在疾病研究中的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):191 發(fā)布日期:2025-11-28  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
在生物醫(yī)藥研究與臨床轉(zhuǎn)化進(jìn)程中,單一指標(biāo)檢測已難以滿足復(fù)雜疾病機(jī)制解析、生物標(biāo)志物篩查及療效評估的需求。樂備實(shí)(LabEx)作為蛋白檢測服務(wù)專家,引入 Luminex 液相芯片技術(shù),憑借其多重檢測、高靈敏定量等核心優(yōu)勢,成為多因子檢測領(lǐng)域的標(biāo)桿技術(shù)平臺,為各科室疾病研究提供高效、精準(zhǔn)的技術(shù)支撐。
 
一、技術(shù)原理與背景:融合創(chuàng)新,突破檢測瓶頸
Luminex 液相芯片技術(shù)是基于微球編碼與流式細(xì)胞術(shù)原理的新型多因子檢測技術(shù),其核心創(chuàng)新在于 “熒光編碼微球” 的應(yīng)用 —— 微球內(nèi)部嵌入三種免疫熒光染料,通過調(diào)整染料配比可實(shí)現(xiàn)數(shù)百種不同微球的特異性編碼,每種編碼微球表面偶聯(lián)針對特定靶標(biāo)的特異性抗體。
 
檢測時,儀器通過雙激光系統(tǒng)完成定性與定量分析:635nm 紅色激光識別微球表面的熒光編碼,精準(zhǔn)判定對應(yīng)靶標(biāo)類型;532nm 綠色激光檢測微球上報告分子(如 PE 熒光基團(tuán))的信號強(qiáng)度,信號強(qiáng)度與靶標(biāo)蛋白結(jié)合量呈正相關(guān),從而實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)分子的精準(zhǔn)定量。該技術(shù)突破了傳統(tǒng)單一檢測技術(shù)的局限,實(shí)現(xiàn)了 “一次實(shí)驗(yàn)、多重檢測” 的核心需求,完美適配復(fù)雜疾病中多因子協(xié)同調(diào)控的研究場景。
 
二、技術(shù)操作流程:標(biāo)準(zhǔn)化流程,兼顧效率與可靠性
樂備實(shí) Luminex 液相芯片檢測遵循標(biāo)準(zhǔn)化操作流程,全程可控且重復(fù)性高,具體步驟如下:
  1. 樣本預(yù)處理:將血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等樣本進(jìn)行常規(guī)處理,去除雜質(zhì)干擾;
  2. 微球孵育:將特異性編碼微球與樣本混合,在適宜溫度下孵育,使微球表面抗體與樣本中目標(biāo)因子特異性結(jié)合;
  3. 信號放大:加入生物素標(biāo)記的二抗孵育,隨后加入酶標(biāo)親和素,形成 “微球 - 靶標(biāo) - 二抗 - 親和素” 的免疫復(fù)合物,放大檢測信號;
  4. 洗滌純化:通過洗滌步驟去除未結(jié)合的游離成分,降低背景干擾;
  5. 上機(jī)檢測:將反應(yīng)體系注入 Luminex 檢測儀,雙激光同步采集微球編碼與熒光信號;
  6. 數(shù)據(jù)分析:借助專業(yè)軟件解析信號數(shù)據(jù),輸出各靶標(biāo)因子的定量結(jié)果,支持多指標(biāo)數(shù)據(jù)關(guān)聯(lián)分析。
  
三、技術(shù)優(yōu)勢:相較于基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn),重塑多因子檢測體驗(yàn)
與 ELISA、Western Blot 等傳統(tǒng)基礎(chǔ)檢測技術(shù)相比,樂備實(shí) Luminex 液相芯片技術(shù)具備顯著優(yōu)勢,具體對比如下:
檢測通量 單次僅能檢測 1 個指標(biāo),多指標(biāo)需重復(fù)實(shí)驗(yàn) 單次實(shí)驗(yàn)可同步檢測 10-50 種指標(biāo),大幅提升檢測效率
樣本用量 需較多樣本量(如 ELISA 單指標(biāo)需 50-100μL) 微量樣本即可滿足檢測(僅需 25-50μL),適配珍稀樣本(如臨床少量血清、腦脊液)
靈敏度 ELISA 靈敏度多為 ng/mL 級別,WB 半定量且靈敏度有限 靈敏度達(dá) pg/mL 級別,可精準(zhǔn)檢測低豐度靶標(biāo)(如微量細(xì)胞因子、生物標(biāo)志物)
數(shù)據(jù)一致性 多指標(biāo)檢測需多次操作,實(shí)驗(yàn)誤差較大 單管反應(yīng)完成多指標(biāo)檢測,減少操作誤差,數(shù)據(jù)重復(fù)性更高
成本效益 多指標(biāo)檢測需購買多個試劑盒,成本較高 單試劑盒覆蓋多指標(biāo),降低試劑與人力成本,性價比更優(yōu)
  
此外,該技術(shù)還具備寬線性范圍(動態(tài)范圍可達(dá) 3-5 個數(shù)量級)、高特異性(抗體特異性結(jié)合 + 微球編碼雙重質(zhì)控)、低背景干擾等優(yōu)勢,完美解決傳統(tǒng)技術(shù) “通量低、樣本消耗大、低豐度指標(biāo)難檢出” 的痛點(diǎn)。
 
四、疾病領(lǐng)域應(yīng)用:聚焦消化內(nèi)科,助力炎癥性腸病研究
炎癥性腸。↖BD)是消化內(nèi)科常見的慢性非特異性腸道炎癥性疾病,包括克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎等,其發(fā)病機(jī)制與腸道免疫紊亂、炎癥因子失衡、腸道屏障損傷密切相關(guān)。樂備實(shí) Luminex 液相芯片技術(shù)憑借多因子同步檢測能力,成為 IBD 研究的核心技術(shù)工具,具體應(yīng)用如下:
1. 發(fā)病機(jī)制解析
IBD 的病理過程涉及 IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-17A、IFN-γ 等促炎因子與 IL-10、TGF-β 等抗炎因子的失衡。通過 Luminex 技術(shù)可一次性檢測患者血清、腸道組織勻漿中 20 + 種炎癥因子,快速明確不同病程中因子表達(dá)譜的變化,揭示 “促炎 - 抗炎” 失衡的核心機(jī)制,為靶向治療提供理論依據(jù)。
2. 生物標(biāo)志物篩查
臨床中 IBD 診斷多依賴內(nèi)鏡與病理活檢,缺乏便捷的血清學(xué)標(biāo)志物。利用 Luminex 技術(shù)對 IBD 患者與健康人群的血清樣本進(jìn)行多因子篩查,可快速篩選出特異性標(biāo)志物組合(如 IL-6+TNF-α+IL-23+MCP-1),輔助 IBD 的早期診斷、亞型區(qū)分及病情嚴(yán)重程度評估。
3. 治療療效監(jiān)測
抗 TNF-α 單抗、IL-12/23 抑制劑等生物制劑是 IBD 的核心治療藥物,但其療效存在個體差異。通過 Luminex 技術(shù)動態(tài)監(jiān)測治療前后患者體內(nèi)炎癥因子譜的變化,可快速評估藥物對炎癥通路的抑制效果,及時調(diào)整治療方案,避免無效治療,實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)醫(yī)療。
4. 藥物研發(fā)輔助
在 IBD 新型藥物研發(fā)中,Luminex 技術(shù)可同步檢測藥物干預(yù)后細(xì)胞模型或動物模型中多類靶點(diǎn)因子(如炎癥因子、腸道屏障相關(guān)蛋白)的表達(dá)變化,快速評估藥物的抗炎活性與作用靶點(diǎn),縮短藥物篩選周期。
     
五、解決的核心難題
  1. 樣本稀缺難題:IBD 患者腸道組織樣本、兒童或老年患者血清樣本量有限,Luminex 微量樣本檢測能力可最大化利用珍稀樣本,避免樣本浪費(fèi);
  2. 多因子同步分析難題:傳統(tǒng)技術(shù)需多次實(shí)驗(yàn)才能完成多因子檢測,耗時耗力且數(shù)據(jù)可比性差,Luminex 單管檢測實(shí)現(xiàn)多指標(biāo)同步定量,大幅提升研究效率;
  3. 低豐度指標(biāo)檢出難題:IBD 早期患者體內(nèi)炎癥因子水平較低,傳統(tǒng) ELISA 難以精準(zhǔn)檢出,Luminex pg 級靈敏度可捕捉早期因子變化,助力疾病早診早治;
  4. 數(shù)據(jù)關(guān)聯(lián)分析難題:通過多因子表達(dá)譜數(shù)據(jù),可快速建立因子間的相關(guān)性網(wǎng)絡(luò),明確核心調(diào)控因子,為機(jī)制研究提供更全面的數(shù)據(jù)支撐。
   
Luminex檢測技術(shù)哪個公司提供?
提供該高性價比 Luminex 液相芯片檢測技術(shù)的是上海樂備實(shí)生物技術(shù)有限公司(LabEx),其爆款服務(wù)產(chǎn)品包括:
  1. 貨號 LXLBH27-1:Luminex 液相芯片人細(xì)胞因子-27因子Panel(人,炎癥方向),覆蓋 G-CSF、GM-CSF、IL-1β、IL-6、TNF-α 等 27 種核心炎癥因子;
  2. 貨號 LXLBM23-1:Luminex 液相芯片小鼠細(xì)胞因子-23因子Panel(小鼠,炎癥方向),包含 IL-17A、IFN-γ、KC、MCP-1 等 23 種小鼠炎癥與免疫相關(guān)因子;
  3. 貨號 LXLBH48-1:Luminex 液相芯片人細(xì)胞因子-48因子Panel(人,多因子方向),涵蓋 FGF-basic、HGF、VEGF、IL-18 等 48 種多通路因子,適配復(fù)雜疾病研究。

樂備實(shí)是國內(nèi)專注于提供高質(zhì)量蛋白檢測以及組學(xué)分析服務(wù)的實(shí)驗(yàn)服務(wù)專家,自2018年成立以來,樂備實(shí)不斷尋求突破,公司的服務(wù)技術(shù)平臺已擴(kuò)展到單細(xì)胞測序、空間多組學(xué)、流式檢測、超敏電化學(xué)發(fā)光、Luminex多因子檢測、抗體芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫組化、DSP空間多組學(xué)等30多個,建立起了一套涵蓋基因、蛋白、細(xì)胞以及組織水平實(shí)驗(yàn)的完整檢測體系。
發(fā)布者:上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司
聯(lián)系電話:15921930842
E-mail:yh-wang@univ-bio.com

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