細(xì)胞活力檢測方法盤點：MTT，CCK-8，ATP發(fā)光檢測法
MTT 元老、CCK-8 新貴、ATP 實力派...誰才是 C 位？ MCE 上新 ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒 (以下簡稱 ATP 發(fā)光法)，簡單、靈敏、快速的均質(zhì)檢測方法，堪稱細(xì)胞活力檢測的 "金標(biāo)準(zhǔn)"！
Section.01
細(xì)胞活力檢測大PK
常用的細(xì)胞活力檢測主要有 MTT、CCK8、Cell-ATP (CTG) 檢測法等。首先，我們先來簡單看下這些檢測方法的原理、操作流程及優(yōu)缺點~
方法 1：MTT 法
MTT法：又稱 MTT 比色法。
原理
活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性 MTT 還原為不溶于水的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜 (Formazan) 并沉積在細(xì)胞中，但死細(xì)胞無此功能，后經(jīng) DMSO 溶解，于 490 nm 處測定吸光值便可間接反應(yīng)細(xì)胞活力。
流程
MTT 作為“元老”級別的檢測方法，雖然“老練”，Paper 無數(shù)，但麻煩是真麻煩。當(dāng)然，該方法除去操作步驟耗時以外，生成的 Formazan 是不溶于水的，需經(jīng) DMSO 溶解后才能檢測，增加了工作量的同時仍不能保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，且該溶劑對人體具有明顯毒性。
方法 2：CCK8 法
相較于 MTT，CCK8 法無論是操作步驟還是檢測時間都優(yōu)化了很多！
原理
CCK8 是一種基于 WST-8 而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速、高靈敏度、無放射性的比色檢測方法(可看往期推文 CCK-8，讓細(xì)胞活性檢測 So Easy!)。
流程
具體操作如下圖所示: 1) 96 孔板中每孔加入 10 μL 的 CCK-8 溶液 (注意不要產(chǎn)生氣泡); 2) 培養(yǎng)箱培養(yǎng) 1-4 h (避免放在培養(yǎng)箱邊緣位置); 3) 酶標(biāo)儀測定在 450 nm 處的吸光度。
案例
不同濃度 KN93 和 Gemcitabine 對 CCLP1 cell 活力的影響
圖 1. KN93 和 Gemcitabine 對 CCLP1 細(xì)胞活力影響[1]。
CCK-8 檢測細(xì)胞活力發(fā)現(xiàn) KN93 可以增強 Gemcitabine 對 CCLP1 的敏感性。
但在實驗時，一直有個問題讓人很困擾——“細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺”，但這個顏色深淺的標(biāo)準(zhǔn)我 “標(biāo)” 不出來怎么辦？痛點！痛點！痛點！
莫慌~試試 ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測！簡單、靈敏、快速，反應(yīng) 10 分鐘即可得到“Bling Bling”的檢測結(jié)果，堪稱細(xì)胞活力檢測的"金標(biāo)準(zhǔn)"！
方法 3：ATP 發(fā)光法
ATP 發(fā)光法基于高靈敏度生物發(fā)光檢測技術(shù)，通過對三磷酸腺苷 (ATP) 進(jìn)行定量以測定培養(yǎng)物中活細(xì)胞數(shù)目及細(xì)胞活力。
原理
熒光素酶以熒光素、三磷酸腺苷 (ATP) 和 O2 為底物，在 Mg2+ 存在時，可將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能。在熒光素酶催化的發(fā)光反應(yīng)中，ATP 在一定的濃度范圍內(nèi)，其濃度與發(fā)光強度呈線性關(guān)系。此方法不受化合物自發(fā)熒光的影響。
流程
具體操作如下：
1) 取出細(xì)胞培養(yǎng)板，室溫平衡 10 min;
2) 96 孔板中每孔直接加入 100 μL Cell-ATP 檢測試劑;
3) 室溫振蕩混勻 2 min，以促進(jìn)細(xì)胞充分裂解;
4) 室溫孵育 10 min (可根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果調(diào)整孵育時間)，使發(fā)光信號趨于穩(wěn)定;
5) 使用具有檢測化學(xué)發(fā)光功能的多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行化學(xué)發(fā)光測定 (檢測參數(shù)可根據(jù)儀器類型及檢測靈敏度適當(dāng)調(diào)整)。
該實驗方法可用三個字簡單概括 “快、準(zhǔn)、狠”，比 MTT 的處理速度快近 20 倍，節(jié)省時間近 4 小時。ATP 特有的均質(zhì)檢測法即 “加樣-混樣-檢測”，使用時，只需將本試劑等體積添加至培養(yǎng)細(xì)胞中即可進(jìn)行檢測。不用感慨，細(xì)胞活力檢測為什么不能如此簡單？
表 1. MTT、CCK8 與 ATP 法特點比較
Section.02
ATP 發(fā)光法, 適用于哪些實驗?
首先，ATP 作為細(xì)胞新陳代謝的一個重要指標(biāo)，與活細(xì)胞數(shù)目呈良好的線性關(guān)系，是細(xì)胞活力檢測的重要標(biāo)志性分子。
ATP 生物發(fā)光法的原理為：熒光素酶以熒光素、ATP 和 O2 為底物，在 Mg2+ 存在時，可將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能；在熒光素酶催化的發(fā)光反應(yīng)中，ATP 在一定的濃度范圍內(nèi)，其濃度與發(fā)光強度呈線性關(guān)系，即在光信號與酶反應(yīng)體系中，發(fā)光值與 ATP 呈正比，ATP 與活細(xì)胞數(shù)成正比，ATP 發(fā)光法通過 ATP 含量來進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)或活力測定，且不受化合物自發(fā)熒光的影響 (圖 2)，是細(xì)胞增殖測定，細(xì)胞活力測定和細(xì)胞毒性高通量篩選分析的理想選擇。
圖 2. ATP 發(fā)光法檢測原理
案例 1：細(xì)胞增殖測定
如圖 3 所示，為了探究 SIPL1 對 TNBC 細(xì)胞增殖的影響，將 SIPL1 表達(dá)載體轉(zhuǎn)染至 BT-549 與 MDA-MB-231 細(xì)胞， 并使用 CCK8 法與 ATP 法，進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測。
圖 3. SIPL1 對 TNBC 細(xì)胞活力的影響[2]。
CCK-8 (a) 和 ATP 發(fā)光細(xì)胞活力測定 (b) 用指示載體轉(zhuǎn)導(dǎo) BT-549 和 MDA-MB-231 細(xì)胞增殖能力的分析。
案例 2：細(xì)胞活力測定
如圖 4 所示，為了探究外源 RRM2 是否會影響肝癌細(xì)胞的鐵死亡，在 HepG2 和 SMMC-7721 細(xì)胞中過表達(dá)或敲除 RRM2，通過 ATP 發(fā)光法檢測其對細(xì)胞活力的影響。結(jié)果表明，過表達(dá) RRM2 時，細(xì)胞活力明顯增強，反之，敲除 RRM2 時，細(xì)胞活力明顯降低[2]。
圖 4. 通過 ATP 法測定 RRM2 對細(xì)胞活力的影響[3]。
(a) 在體外表達(dá)或敲除 RRM2 的 HepG2 和 SMMC-7721 細(xì)胞中測量細(xì)胞死亡 (b) 和 4-HNE 水平 (c)，然后再用 Fer-1、ZVAD-FMK、Nec-1 或體外表達(dá)的 RRM2 進(jìn)行進(jìn)一步處理。細(xì)胞活力測定采用 ATP 發(fā)光細(xì)胞活力測定法。
案例 3：細(xì)胞毒性高通量篩選分析
如下圖所示，作者團隊報告了一種基于濃度-反應(yīng)曲線的表型定量高通量篩選 (qHTS)，旨在識別對瘧原蟲肝臟和無性血期寄生蟲具有活性的化合物 (圖 5)。使用 SYBR Green 或熒光素酶來測試對寄生蟲生長的抑制，共檢測了 456,817 種化合物。
在 qHTS 之后，又分類選擇了 4,253 種合成易處理的化合物，用于驗證抗瘧原蟲活性和哺乳動物毒性。在 3 μM 和 1 μM 濃度下對化合物進(jìn)行體外抗伯氏瘧原蟲肝期寄生蟲的評估。其中使用 ATP 發(fā)光法評估了所有 4,253 種化合物對 HepG2 的細(xì)胞毒性。其中 255 種化合物對 HepG2 細(xì)胞表現(xiàn)出一定程度的生長細(xì)胞毒性，AC50 值 < 43 μM (隨后被排除)。最終篩選出 994 種經(jīng)過驗證的無毒性化合物，用于針對肝階段寄生蟲的后續(xù)評估。
圖 5. 針對惡性瘧原蟲無性血期寄生蟲的定量高通量篩選[4]。
Section.03
ATP 發(fā)光法活力檢測
圖 6. MCE Cell-ATP Viability Detection Kit 與同類產(chǎn)品（競品）對比測試結(jié)果。
a. 產(chǎn)品發(fā)光穩(wěn)定性測試（293T 細(xì)胞)；b. 不同細(xì)胞數(shù)的線性范圍比較 (293T 細(xì)胞)；c. 不同細(xì)胞系的檢測結(jié)果比較 (293T、H4IIE、Jurkat 細(xì)胞)
對比測試結(jié)果表明：持續(xù) 3 h 的生物發(fā)光穩(wěn)定性的檢測中，MCE Cell-ATP 檢測試劑 的發(fā)光信號值比較穩(wěn)定 (圖 6a)；不同細(xì)胞數(shù)的線性范圍中，MCE 產(chǎn)品線性關(guān)系良好，與進(jìn)口 競品線性幾乎一致 (圖 6b)；且對于不同細(xì)胞系，MCE 產(chǎn)品與進(jìn)口競品檢測信號值相當(dāng) (圖 6c)。綜上檢測結(jié)果表明，MCE ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒可實現(xiàn)穩(wěn)定、靈敏、批次間差異較小的不同細(xì)胞系的細(xì)胞活力檢測。
表 2. MCE Cell-ATP 檢測試劑盒產(chǎn)品特性
靠譜的 ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑，尊貴的 VIP 客戶體驗，想發(fā) SCI 深夢囈語的心。無需按捺您的“蠢蠢欲動”，MCE 官網(wǎng)可申領(lǐng)試用裝 (試用裝鏈接)。體驗不收費，時間最寶貴~ 快快申領(lǐng)吧！
實驗小 Tips，附上 ATP 法使用注意事項，希望你能早日發(fā) SCI 啦。
1. 熒光素酶的活性對溫度較為敏感，反復(fù)凍融會致其逐漸失活，建議分裝凍存，避免反復(fù)凍融。凍融時，可能會導(dǎo)致試劑中出現(xiàn)少量沉淀，可平衡至室溫后觀測沉淀溶解情況，如仍有殘留，可離心后去除。
2. 本產(chǎn)品在使用或分裝時所使用耗材應(yīng)注意避免 ATP 污染。
3. 若待測藥物的溶劑含量較高，熒光素酶反應(yīng)可能會被干擾，致化學(xué)發(fā)光信號受到影響，可設(shè)置含有溶劑的細(xì)胞培養(yǎng)液的對照孔以排除此干擾。
4. 檢測時需使用適合于細(xì)胞培養(yǎng)的白色或黑色的多孔板 (96 孔板或 384 孔板)，普通透明多孔板的相鄰孔之間可能會產(chǎn)生相互干擾。如使用透明板，可使用不透明的白色膠帶粘貼孔底。
5. 建議在避光環(huán)境下進(jìn)行熒光檢測。
6. 由于整個發(fā)光反應(yīng)非常迅速，建議加入 ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑孵育 10 分鐘后，立即檢測熒光。
Section.01
細(xì)胞活力檢測大PK
常用的細(xì)胞活力檢測主要有 MTT、CCK8、Cell-ATP (CTG) 檢測法等。首先，我們先來簡單看下這些檢測方法的原理、操作流程及優(yōu)缺點~
方法 1：MTT 法
MTT法：又稱 MTT 比色法。
原理
活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性 MTT 還原為不溶于水的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜 (Formazan) 并沉積在細(xì)胞中，但死細(xì)胞無此功能，后經(jīng) DMSO 溶解，于 490 nm 處測定吸光值便可間接反應(yīng)細(xì)胞活力。
流程
MTT 作為“元老”級別的檢測方法，雖然“老練”，Paper 無數(shù)，但麻煩是真麻煩。當(dāng)然，該方法除去操作步驟耗時以外，生成的 Formazan 是不溶于水的，需經(jīng) DMSO 溶解后才能檢測，增加了工作量的同時仍不能保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，且該溶劑對人體具有明顯毒性。
方法 2：CCK8 法
相較于 MTT，CCK8 法無論是操作步驟還是檢測時間都優(yōu)化了很多！
原理
CCK8 是一種基于 WST-8 而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速、高靈敏度、無放射性的比色檢測方法(可看往期推文 CCK-8，讓細(xì)胞活性檢測 So Easy!)。
流程
具體操作如下圖所示: 1) 96 孔板中每孔加入 10 μL 的 CCK-8 溶液 (注意不要產(chǎn)生氣泡); 2) 培養(yǎng)箱培養(yǎng) 1-4 h (避免放在培養(yǎng)箱邊緣位置); 3) 酶標(biāo)儀測定在 450 nm 處的吸光度。
案例
不同濃度 KN93 和 Gemcitabine 對 CCLP1 cell 活力的影響
- 細(xì)胞系: CCLP1 cells
- 培養(yǎng)條件: DMEM+10%FBS+1% amphotericin B/penicillin/streptomycin,1-2 h 后取樣檢測
- 實驗結(jié)果: KN93 可增強 Gemcitabine 對 CCLP1 細(xì)胞的敏感性
圖 1. KN93 和 Gemcitabine 對 CCLP1 細(xì)胞活力影響[1]。CCK-8 檢測細(xì)胞活力發(fā)現(xiàn) KN93 可以增強 Gemcitabine 對 CCLP1 的敏感性。
但在實驗時，一直有個問題讓人很困擾——“細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺”，但這個顏色深淺的標(biāo)準(zhǔn)我 “標(biāo)” 不出來怎么辦？痛點！痛點！痛點！
莫慌~試試 ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測！簡單、靈敏、快速，反應(yīng) 10 分鐘即可得到“Bling Bling”的檢測結(jié)果，堪稱細(xì)胞活力檢測的"金標(biāo)準(zhǔn)"！
方法 3：ATP 發(fā)光法
ATP 發(fā)光法基于高靈敏度生物發(fā)光檢測技術(shù)，通過對三磷酸腺苷 (ATP) 進(jìn)行定量以測定培養(yǎng)物中活細(xì)胞數(shù)目及細(xì)胞活力。
原理
熒光素酶以熒光素、三磷酸腺苷 (ATP) 和 O2 為底物，在 Mg2+ 存在時，可將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能。在熒光素酶催化的發(fā)光反應(yīng)中，ATP 在一定的濃度范圍內(nèi)，其濃度與發(fā)光強度呈線性關(guān)系。此方法不受化合物自發(fā)熒光的影響。
流程
具體操作如下：
1) 取出細(xì)胞培養(yǎng)板，室溫平衡 10 min;
2) 96 孔板中每孔直接加入 100 μL Cell-ATP 檢測試劑;
3) 室溫振蕩混勻 2 min，以促進(jìn)細(xì)胞充分裂解;
4) 室溫孵育 10 min (可根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果調(diào)整孵育時間)，使發(fā)光信號趨于穩(wěn)定;
5) 使用具有檢測化學(xué)發(fā)光功能的多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行化學(xué)發(fā)光測定 (檢測參數(shù)可根據(jù)儀器類型及檢測靈敏度適當(dāng)調(diào)整)。
該實驗方法可用三個字簡單概括 “快、準(zhǔn)、狠”，比 MTT 的處理速度快近 20 倍，節(jié)省時間近 4 小時。ATP 特有的均質(zhì)檢測法即 “加樣-混樣-檢測”，使用時，只需將本試劑等體積添加至培養(yǎng)細(xì)胞中即可進(jìn)行檢測。不用感慨，細(xì)胞活力檢測為什么不能如此簡單？
表 1. MTT、CCK8 與 ATP 法特點比較
Section.02
ATP 發(fā)光法, 適用于哪些實驗?
首先，ATP 作為細(xì)胞新陳代謝的一個重要指標(biāo)，與活細(xì)胞數(shù)目呈良好的線性關(guān)系，是細(xì)胞活力檢測的重要標(biāo)志性分子。
ATP 生物發(fā)光法的原理為：熒光素酶以熒光素、ATP 和 O2 為底物，在 Mg2+ 存在時，可將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能；在熒光素酶催化的發(fā)光反應(yīng)中，ATP 在一定的濃度范圍內(nèi)，其濃度與發(fā)光強度呈線性關(guān)系，即在光信號與酶反應(yīng)體系中，發(fā)光值與 ATP 呈正比，ATP 與活細(xì)胞數(shù)成正比，ATP 發(fā)光法通過 ATP 含量來進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)或活力測定，且不受化合物自發(fā)熒光的影響 (圖 2)，是細(xì)胞增殖測定，細(xì)胞活力測定和細(xì)胞毒性高通量篩選分析的理想選擇。
圖 2. ATP 發(fā)光法檢測原理 案例 1：細(xì)胞增殖測定
如圖 3 所示，為了探究 SIPL1 對 TNBC 細(xì)胞增殖的影響，將 SIPL1 表達(dá)載體轉(zhuǎn)染至 BT-549 與 MDA-MB-231 細(xì)胞， 并使用 CCK8 法與 ATP 法，進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測。
- CCK-8 檢測：TNBC 細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染 shRNA 或過表達(dá)質(zhì)粒并培養(yǎng) 24 h 后檢測。
- ATP 發(fā)光細(xì)胞活力測定：TNBC 細(xì)胞在 37°C 下培養(yǎng)過夜。然后，將 100 μL ATP 發(fā)光法活力檢測試劑直接與培養(yǎng)基混合，在室溫下培養(yǎng) 20 分鐘。結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染靶向 SIPL1 shRNAs 的 BT-549 和 MDA-MB-231 細(xì)胞系的細(xì)胞增殖顯著降低 (圖 3)。
圖 3. SIPL1 對 TNBC 細(xì)胞活力的影響[2]。CCK-8 (a) 和 ATP 發(fā)光細(xì)胞活力測定 (b) 用指示載體轉(zhuǎn)導(dǎo) BT-549 和 MDA-MB-231 細(xì)胞增殖能力的分析。
案例 2：細(xì)胞活力測定
如圖 4 所示，為了探究外源 RRM2 是否會影響肝癌細(xì)胞的鐵死亡，在 HepG2 和 SMMC-7721 細(xì)胞中過表達(dá)或敲除 RRM2，通過 ATP 發(fā)光法檢測其對細(xì)胞活力的影響。結(jié)果表明，過表達(dá) RRM2 時，細(xì)胞活力明顯增強，反之，敲除 RRM2 時，細(xì)胞活力明顯降低[2]。
圖 4. 通過 ATP 法測定 RRM2 對細(xì)胞活力的影響[3]。(a) 在體外表達(dá)或敲除 RRM2 的 HepG2 和 SMMC-7721 細(xì)胞中測量細(xì)胞死亡 (b) 和 4-HNE 水平 (c)，然后再用 Fer-1、ZVAD-FMK、Nec-1 或體外表達(dá)的 RRM2 進(jìn)行進(jìn)一步處理。細(xì)胞活力測定采用 ATP 發(fā)光細(xì)胞活力測定法。
案例 3：細(xì)胞毒性高通量篩選分析
如下圖所示，作者團隊報告了一種基于濃度-反應(yīng)曲線的表型定量高通量篩選 (qHTS)，旨在識別對瘧原蟲肝臟和無性血期寄生蟲具有活性的化合物 (圖 5)。使用 SYBR Green 或熒光素酶來測試對寄生蟲生長的抑制，共檢測了 456,817 種化合物。
在 qHTS 之后，又分類選擇了 4,253 種合成易處理的化合物，用于驗證抗瘧原蟲活性和哺乳動物毒性。在 3 μM 和 1 μM 濃度下對化合物進(jìn)行體外抗伯氏瘧原蟲肝期寄生蟲的評估。其中使用 ATP 發(fā)光法評估了所有 4,253 種化合物對 HepG2 的細(xì)胞毒性。其中 255 種化合物對 HepG2 細(xì)胞表現(xiàn)出一定程度的生長細(xì)胞毒性，AC50 值 < 43 μM (隨后被排除)。最終篩選出 994 種經(jīng)過驗證的無毒性化合物，用于針對肝階段寄生蟲的后續(xù)評估。
圖 5. 針對惡性瘧原蟲無性血期寄生蟲的定量高通量篩選[4]。Section.03
ATP 發(fā)光法活力檢測
圖 6. MCE Cell-ATP Viability Detection Kit 與同類產(chǎn)品（競品）對比測試結(jié)果。a. 產(chǎn)品發(fā)光穩(wěn)定性測試（293T 細(xì)胞)；b. 不同細(xì)胞數(shù)的線性范圍比較 (293T 細(xì)胞)；c. 不同細(xì)胞系的檢測結(jié)果比較 (293T、H4IIE、Jurkat 細(xì)胞)
對比測試結(jié)果表明：持續(xù) 3 h 的生物發(fā)光穩(wěn)定性的檢測中，MCE Cell-ATP 檢測試劑 的發(fā)光信號值比較穩(wěn)定 (圖 6a)；不同細(xì)胞數(shù)的線性范圍中，MCE 產(chǎn)品線性關(guān)系良好，與進(jìn)口 競品線性幾乎一致 (圖 6b)；且對于不同細(xì)胞系，MCE 產(chǎn)品與進(jìn)口競品檢測信號值相當(dāng) (圖 6c)。綜上檢測結(jié)果表明，MCE ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒可實現(xiàn)穩(wěn)定、靈敏、批次間差異較小的不同細(xì)胞系的細(xì)胞活力檢測。
表 2. MCE Cell-ATP 檢測試劑盒產(chǎn)品特性
靠譜的 ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑，尊貴的 VIP 客戶體驗，想發(fā) SCI 深夢囈語的心。無需按捺您的“蠢蠢欲動”，MCE 官網(wǎng)可申領(lǐng)試用裝 (試用裝鏈接)。體驗不收費，時間最寶貴~ 快快申領(lǐng)吧！
實驗小 Tips，附上 ATP 法使用注意事項，希望你能早日發(fā) SCI 啦。
1. 熒光素酶的活性對溫度較為敏感，反復(fù)凍融會致其逐漸失活，建議分裝凍存，避免反復(fù)凍融。凍融時，可能會導(dǎo)致試劑中出現(xiàn)少量沉淀，可平衡至室溫后觀測沉淀溶解情況，如仍有殘留，可離心后去除。
2. 本產(chǎn)品在使用或分裝時所使用耗材應(yīng)注意避免 ATP 污染。
3. 若待測藥物的溶劑含量較高，熒光素酶反應(yīng)可能會被干擾，致化學(xué)發(fā)光信號受到影響，可設(shè)置含有溶劑的細(xì)胞培養(yǎng)液的對照孔以排除此干擾。
4. 檢測時需使用適合于細(xì)胞培養(yǎng)的白色或黑色的多孔板 (96 孔板或 384 孔板)，普通透明多孔板的相鄰孔之間可能會產(chǎn)生相互干擾。如使用透明板，可使用不透明的白色膠帶粘貼孔底。
5. 建議在避光環(huán)境下進(jìn)行熒光檢測。
6. 由于整個發(fā)光反應(yīng)非常迅速，建議加入 ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑孵育 10 分鐘后，立即檢測熒光。
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產(chǎn)品推薦 |
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Cell Counting Kit-8，簡稱 CCK-8 試劑盒或 CCK8 試劑盒，是一種基于 WST-8 而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞活性和細(xì)胞毒性檢測的快速、高靈敏度試劑盒。 |
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Cell-ATP Viability Detection Reagent MCE ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒基于高靈敏度生物發(fā)光檢測技術(shù)，通過對 ATP 進(jìn)行定量以測定培養(yǎng)物中活細(xì)胞數(shù)目及細(xì)胞活力。 |
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MCE LDH Assay Kit 是通過分析釋放到培養(yǎng)上清液中的 LDH 活性而測定細(xì)胞損傷的試劑盒。配合使用 CCK-8 (Cat.: No. HY-K0301) 可獲得死細(xì)胞、活細(xì)胞數(shù)據(jù)。 |
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ATP 發(fā)光法 3D 細(xì)胞活力檢測試劑盒基于高靈敏度生物發(fā)光檢測技術(shù) (熒光素酶系統(tǒng))，通過對 ATP 進(jìn)行定量以測定培養(yǎng)物中 3D 細(xì)胞數(shù)目及細(xì)胞活力。? |
[1] Fu Y, et al. Alpha5 nicotine acetylcholine receptor subunit promotes intrahepatic cholangiocarcinoma metastasis. Signal Transduct Target Ther. 2024 Mar 8;9(1):63.
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