D-熒光素鉀鹽的核心作用及在生物發(fā)光實驗等中的應用
如果你從事生物實驗，尤其是涉及活體成像、基因表達檢測的研究，那大概率會用到熒光素酶相關的實驗體系 —— 而愛必信（Absin）品牌的 D - 熒光素鉀鹽，就是這個體系里常用的關鍵底物，今天就來簡單介紹下這款實用的實驗產(chǎn)品。
一、產(chǎn)品基本信息
愛必信 D - 熒光素鉀鹽（貨號：abs42075819-1g）有明確的化學特性和穩(wěn)定的品質(zhì)：
分子式為 C₁₁H₇N₂O₃S₂・K，分子量 318.41，CAS 號 115144-35-9；
純度＞98%，外觀是淡黃色粉末，易溶于水（溶解度≥30mg/mL），能輕松配制成實驗所需的溶液；
運輸需在 2～8℃條件下，固體狀態(tài)下 - 20℃避光保存有效期 1 年，配成溶液后 - 80℃保存有效期 3 個月，注意避免反復凍融。
二、它為什么能發(fā)光？
D - 熒光素鉀鹽的核心作用，是作為熒光素酶（Luciferase）的底物產(chǎn)生生物發(fā)光，具體過程不復雜：
在有氧環(huán)境下，還有 Mg²⁺和 ATP（三磷酸腺苷）的參與，D - 熒光素鉀鹽會在熒光素酶的催化下發(fā)生反應 —— 先生成熒光素 - AMP 復合體并釋放焦磷酸，接著這個復合體再和氧氣反應生成氧化熒光素，同時釋放 CO₂和 H₂O。
而在這個過程中，處于 “激發(fā)態(tài)” 的氧化熒光素會回到穩(wěn)定的 “基態(tài)”，這個過程就會發(fā)出 540-600nm 的藍綠光。
利用這個特性，我們可以做很多研究：比如把帶熒光素酶基因（Luc）的質(zhì)粒轉(zhuǎn)進細胞，再把細胞導入實驗動物（像小鼠）體內(nèi)，之后注入 D - 熒光素鉀鹽，通過生物發(fā)光成像技術（BLI）觀察光的強度，就能實時監(jiān)測疾病發(fā)展、藥物治療效果；也能通過 ATP 對這個反應的影響，判斷實驗體系里的能量或生命體征情況。
三、怎么用？
D - 熒光素鉀鹽主要用于 “體外生物發(fā)光檢測” 和 “活體成像分析”，兩種場景的操作步驟都比較清晰：
1. 體外生物發(fā)光檢測（比如細胞實驗）
第一步配儲備液：用無菌純凈水溶解，配成 30mg/mL 的儲備液（濃度是 100-200×），搖勻就能用；用不完的儲備液分裝后，-20℃避光保存，別反復凍融，不然會影響活性。
第二步配工作液：把組織培養(yǎng)基在 37℃恒溫下預熱 10-20 分鐘，再用預熱好的培養(yǎng)基把儲備液稀釋到 0.15-0.3mg/mL（具體濃度可根據(jù)實驗調(diào)整），得到工作液。
第三步處理細胞：去掉細胞原來的培養(yǎng)基，加入配好的工作液，在 37℃下孵育 5-10 分鐘，之后就能進行圖像分析了。
2. 活體成像分析（比如動物實驗）
第一步配儲備液：用不含鈣、鎂離子的無菌 DPBS 緩沖液溶解，配成 15mg/mL 的儲備液，搖勻后用 0.2μm 水系濾器過濾除菌；用不完的同樣分裝后 - 20℃避光保存，避免反復凍融。
第二步注射：給實驗動物（如小鼠）做腹腔注射，注射劑量按 “150mg/kg 體重” 來算（比如 20g 的小鼠，就注射 0.2mL 儲備液）。
第三步成像：注射后等 10-15 分鐘，待體內(nèi)光信號達到最強且穩(wěn)定的狀態(tài)，再進行成像分析。
四、能用來做什么？
這款產(chǎn)品的應用范圍很廣，在生物技術和相關領域都很實用：
首先是活體成像研究：這是它最主要的用途之一，比如監(jiān)測腫瘤生長、炎癥發(fā)展，或者評估藥物對疾病的治療效果，能實時看到體內(nèi)的變化。
其次是基因表達檢測：如果要檢測和特定啟動子相連的熒光素酶基因的表達情況，用它作為底物，通過發(fā)光強度就能判斷基因的表達水平。
還有免疫測定：熒光素酶常和抗體結合做標記，而 D - 熒光素鉀鹽就是這個標記的檢測底物 —— 它的優(yōu)勢在于，哺乳動物組織里的內(nèi)源性熒光素酶活性很低，而且檢測靈敏度高。
最后是衛(wèi)生監(jiān)測：比如食品加工廠，用它和熒光素酶的反應體系能檢測 ATP（所有生物體都含有 ATP），通過是否發(fā)光、發(fā)光強度，判斷設備表面或產(chǎn)品是否有污染，保障食品衛(wèi)生。
五、實驗注意事項
用的時候注意這幾點，能讓實驗更順利、結果更準確：
注射方式、動物類型、動物體重都會影響發(fā)光信號，建議每次實驗都做 “熒光素酶動力學曲線”，找到最佳的檢測時間和信號穩(wěn)定期。
如果要檢測 ATP，一定要避免外源 ATP 污染：操作時戴手套，用不含 ATP 的實驗耗材，溶解熒光素時用不含 ATP 的無菌水。
全程要避光操作、避光保存：儲備液過濾除菌后分裝到 - 80℃凍存，只能凍融 1 次；有條件的話，給儲備液充氮氣或氬氣，能防止氧化，保存時間能長達 1 年。
溶解時別用含鈣、鎂離子的溶液：一定要用不含鈣、鎂的 DPBS，因為鈣、鎂可能會抑制熒光素酶的活性，還可能影響熒光素的氧化，進而影響檢測結果。
操作安全：記得穿實驗服、戴一次性手套，保護自己的安全和健康。
愛必信 D - 熒光素鉀鹽憑借 “光易透過組織、體內(nèi)代謝慢、特異性好” 的優(yōu)勢，成為了很多活體成像實驗的首選底物，如果你有相關實驗需求，可以通過優(yōu)寧維的鏈接了解更多產(chǎn)品詳情或購買：https://www.univ-bio.com/d-luciferin-potassium-salt/abs42075819-1g.html
一、產(chǎn)品基本信息
愛必信 D - 熒光素鉀鹽（貨號：abs42075819-1g）有明確的化學特性和穩(wěn)定的品質(zhì)：
分子式為 C₁₁H₇N₂O₃S₂・K，分子量 318.41，CAS 號 115144-35-9；
純度＞98%，外觀是淡黃色粉末，易溶于水（溶解度≥30mg/mL），能輕松配制成實驗所需的溶液；
運輸需在 2～8℃條件下，固體狀態(tài)下 - 20℃避光保存有效期 1 年，配成溶液后 - 80℃保存有效期 3 個月，注意避免反復凍融。
二、它為什么能發(fā)光？
D - 熒光素鉀鹽的核心作用，是作為熒光素酶（Luciferase）的底物產(chǎn)生生物發(fā)光，具體過程不復雜：
在有氧環(huán)境下，還有 Mg²⁺和 ATP（三磷酸腺苷）的參與，D - 熒光素鉀鹽會在熒光素酶的催化下發(fā)生反應 —— 先生成熒光素 - AMP 復合體并釋放焦磷酸，接著這個復合體再和氧氣反應生成氧化熒光素，同時釋放 CO₂和 H₂O。
而在這個過程中，處于 “激發(fā)態(tài)” 的氧化熒光素會回到穩(wěn)定的 “基態(tài)”，這個過程就會發(fā)出 540-600nm 的藍綠光。
利用這個特性，我們可以做很多研究：比如把帶熒光素酶基因（Luc）的質(zhì)粒轉(zhuǎn)進細胞，再把細胞導入實驗動物（像小鼠）體內(nèi)，之后注入 D - 熒光素鉀鹽，通過生物發(fā)光成像技術（BLI）觀察光的強度，就能實時監(jiān)測疾病發(fā)展、藥物治療效果；也能通過 ATP 對這個反應的影響，判斷實驗體系里的能量或生命體征情況。
三、怎么用？
D - 熒光素鉀鹽主要用于 “體外生物發(fā)光檢測” 和 “活體成像分析”，兩種場景的操作步驟都比較清晰：
1. 體外生物發(fā)光檢測（比如細胞實驗）
第一步配儲備液：用無菌純凈水溶解，配成 30mg/mL 的儲備液（濃度是 100-200×），搖勻就能用；用不完的儲備液分裝后，-20℃避光保存，別反復凍融，不然會影響活性。
第二步配工作液：把組織培養(yǎng)基在 37℃恒溫下預熱 10-20 分鐘，再用預熱好的培養(yǎng)基把儲備液稀釋到 0.15-0.3mg/mL（具體濃度可根據(jù)實驗調(diào)整），得到工作液。
第三步處理細胞：去掉細胞原來的培養(yǎng)基，加入配好的工作液，在 37℃下孵育 5-10 分鐘，之后就能進行圖像分析了。
2. 活體成像分析（比如動物實驗）
第一步配儲備液：用不含鈣、鎂離子的無菌 DPBS 緩沖液溶解，配成 15mg/mL 的儲備液，搖勻后用 0.2μm 水系濾器過濾除菌；用不完的同樣分裝后 - 20℃避光保存，避免反復凍融。
第二步注射：給實驗動物（如小鼠）做腹腔注射，注射劑量按 “150mg/kg 體重” 來算（比如 20g 的小鼠，就注射 0.2mL 儲備液）。
第三步成像：注射后等 10-15 分鐘，待體內(nèi)光信號達到最強且穩(wěn)定的狀態(tài)，再進行成像分析。
四、能用來做什么？
這款產(chǎn)品的應用范圍很廣，在生物技術和相關領域都很實用：
首先是活體成像研究：這是它最主要的用途之一，比如監(jiān)測腫瘤生長、炎癥發(fā)展，或者評估藥物對疾病的治療效果，能實時看到體內(nèi)的變化。
其次是基因表達檢測：如果要檢測和特定啟動子相連的熒光素酶基因的表達情況，用它作為底物，通過發(fā)光強度就能判斷基因的表達水平。
還有免疫測定：熒光素酶常和抗體結合做標記，而 D - 熒光素鉀鹽就是這個標記的檢測底物 —— 它的優(yōu)勢在于，哺乳動物組織里的內(nèi)源性熒光素酶活性很低，而且檢測靈敏度高。
最后是衛(wèi)生監(jiān)測：比如食品加工廠，用它和熒光素酶的反應體系能檢測 ATP（所有生物體都含有 ATP），通過是否發(fā)光、發(fā)光強度，判斷設備表面或產(chǎn)品是否有污染，保障食品衛(wèi)生。
五、實驗注意事項
用的時候注意這幾點，能讓實驗更順利、結果更準確：
注射方式、動物類型、動物體重都會影響發(fā)光信號，建議每次實驗都做 “熒光素酶動力學曲線”，找到最佳的檢測時間和信號穩(wěn)定期。
如果要檢測 ATP，一定要避免外源 ATP 污染：操作時戴手套，用不含 ATP 的實驗耗材，溶解熒光素時用不含 ATP 的無菌水。
全程要避光操作、避光保存：儲備液過濾除菌后分裝到 - 80℃凍存，只能凍融 1 次；有條件的話，給儲備液充氮氣或氬氣，能防止氧化，保存時間能長達 1 年。
溶解時別用含鈣、鎂離子的溶液：一定要用不含鈣、鎂的 DPBS，因為鈣、鎂可能會抑制熒光素酶的活性，還可能影響熒光素的氧化，進而影響檢測結果。
操作安全：記得穿實驗服、戴一次性手套，保護自己的安全和健康。
愛必信 D - 熒光素鉀鹽憑借 “光易透過組織、體內(nèi)代謝慢、特異性好” 的優(yōu)勢，成為了很多活體成像實驗的首選底物，如果你有相關實驗需求，可以通過優(yōu)寧維的鏈接了解更多產(chǎn)品詳情或購買：https://www.univ-bio.com/d-luciferin-potassium-salt/abs42075819-1g.html
| 名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
| 百日咳毒素溶液 | abs42024902-0.5mL | 0.5mL |
| D-熒光素鉀鹽 | abs42075819-1g | 1g |
| Protein A/G PLUS-Agarose | sc-2003 | 2ml |
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