Olink蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的原理、實(shí)驗(yàn)流程與多領(lǐng)域應(yīng)用解析

特異性抗體探針結(jié)合：每對(duì)靶向特定蛋白的抗體分別標(biāo)記獨(dú)特的DNA寡核苷酸探針

空間鄰近延伸：當(dāng)抗體對(duì)結(jié)合目標(biāo)蛋白后，DNA探針在空間上接近并通過互補(bǔ)配對(duì)，在DNA聚合酶作用下延伸形成特異性雙鏈DNA模板

高靈敏度檢測(cè)：通過qPCR或NGS技術(shù)對(duì)DNA模板進(jìn)行定量分析，信號(hào)強(qiáng)度與原始蛋白濃度呈正相關(guān)

技術(shù)優(yōu)勢(shì)特征
卓越的檢測(cè)靈敏度：可檢測(cè)低至0.1 pg/mL的蛋白濃度，如IL-6、TNF-α等低豐度細(xì)胞因子
廣泛的多重檢測(cè)能力：單次實(shí)驗(yàn)可檢測(cè)92-3072種蛋白，覆蓋炎癥、免疫、代謝等多條生物通路
極低的樣本需求：僅需1μL樣本即可完成92種蛋白分析，特別適用于珍貴臨床樣本
寬廣的動(dòng)態(tài)范圍：覆蓋10個(gè)數(shù)量級(jí)的濃度范圍，可同時(shí)檢測(cè)高豐度和痕量蛋白

三、標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)流程與質(zhì)控體系
樣本制備與預(yù)處理

• 血漿/血清樣本：使用EDTA或肝素抗凝管采集，離心后-80℃保存
• 腦脊液樣本：腰椎穿刺采集后離心去除細(xì)胞碎片，等體積分裝避免反復(fù)凍融
• 組織裂解液：RIPA裂解液勻漿處理，BCA法測(cè)定蛋白濃度

實(shí)驗(yàn)操作流程

1. 抗體探針孵育：樣本與抗體探針4℃過夜孵育，確保充分結(jié)合
2. DNA延伸與預(yù)擴(kuò)增：加入DNA聚合酶延伸形成雙鏈模板，進(jìn)行有限循環(huán)預(yù)擴(kuò)增
3. 信號(hào)檢測(cè)與分析：基于qPCR或NGS平臺(tái)檢測(cè)，計(jì)算歸一化蛋白表達(dá)量

質(zhì)量控制要點(diǎn)
樣本隨機(jī)化排布消除板間差異
設(shè)置內(nèi)參對(duì)照確保數(shù)據(jù)可靠性
建立標(biāo)準(zhǔn)化的數(shù)據(jù)校正流程

四、應(yīng)用場(chǎng)景與典型案例
疾病機(jī)制研究
在MPS III B型溶酶體貯積癥小鼠模型中，通過Olink技術(shù)檢測(cè)腦脊液與血清蛋白差異，成功鑒定CCL3、IL-1α等關(guān)鍵炎癥因子，為靶向治療策略提供了分子依據(jù)。

臨床診斷與分型
神經(jīng)退行性疾病：研究團(tuán)隊(duì)利用Olink技術(shù)發(fā)現(xiàn)21種阿爾茨海默病血液標(biāo)志物，構(gòu)建了診斷效能優(yōu)異的預(yù)測(cè)模型
膿毒癥精準(zhǔn)分型：通過蛋白標(biāo)志物篩選實(shí)現(xiàn)了膿毒癥亞型區(qū)分，為指導(dǎo)臨床治療提供了新思路

藥物研發(fā)應(yīng)用
免疫治療研究：發(fā)現(xiàn)血漿LIF水平與PD-1抑制劑耐藥性相關(guān)，為聯(lián)合治療策略提供了理論支持
靶點(diǎn)驗(yàn)證：證實(shí)TNFSF14通過激活I(lǐng)L-1β/IL-6通路放大炎癥反應(yīng)，成為潛在治療靶點(diǎn)

五、多組學(xué)整合與前沿展望
多組學(xué)整合策略

1. 轉(zhuǎn)錄組-蛋白組聯(lián)合分析：在特應(yīng)性皮炎研究中，結(jié)合單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組與Olink蛋白組數(shù)據(jù)，系統(tǒng)解析了Th2細(xì)胞主導(dǎo)的炎癥微環(huán)境特征
2. 代謝組-蛋白組交叉驗(yàn)證：通過代謝組學(xué)與蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)整合，揭示了鐵代謝調(diào)控在非酒精性脂肪肝發(fā)病中的關(guān)鍵作用
3. 空間多組學(xué)應(yīng)用：結(jié)合空間轉(zhuǎn)錄組與蛋白組數(shù)據(jù)，實(shí)現(xiàn)了腦疾病中神經(jīng)炎癥區(qū)域的精確定位

技術(shù)發(fā)展前景
Olink蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)以其卓越的技術(shù)性能，正在重塑生命科學(xué)研究范式。隨著技術(shù)迭代和成本優(yōu)化，該技術(shù)將在基礎(chǔ)研究、臨床診斷和藥物開發(fā)等領(lǐng)域發(fā)揮更加重要的作用，為精準(zhǔn)醫(yī)療提供強(qiáng)有力的技術(shù)支撐。

Olink蛋白組學(xué)檢測(cè)服務(wù)哪里有？
樂備實(shí)（LabEx）Olink 蛋白組學(xué)檢測(cè)服務(wù)基于獨(dú)有的鄰位延伸分析技術(shù)（PEA），核心優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在高特異性、高靈敏度與超高通量，可滿足從基礎(chǔ)科研到藥物研發(fā)全階段的檢測(cè)需求。其支持 1-8μL 微量樣本檢測(cè)，適配 20 + 類樣本類型，單次可檢測(cè) 21-3072 種蛋白，且數(shù)據(jù)符合 FDA 監(jiān)管要求，學(xué)術(shù)認(rèn)可度高，能為精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)、藥物研發(fā)及健康管理等領(lǐng)域提供高效、可靠的多蛋白同步檢測(cè)解決方案。

樂備實(shí)是國內(nèi)專注于提供高質(zhì)量蛋白檢測(cè)以及組學(xué)分析服務(wù)的實(shí)驗(yàn)服務(wù)專家，自2018年成立以來，樂備實(shí)不斷尋求突破，公司的服務(wù)技術(shù)平臺(tái)已擴(kuò)展到單細(xì)胞測(cè)序、空間多組學(xué)、流式檢測(cè)、超敏電化學(xué)發(fā)光、Luminex多因子檢測(cè)、抗體芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫組化、DSP空間多組學(xué)等30多個(gè)，建立起了一套涵蓋基因、蛋白、細(xì)胞以及組織水平實(shí)驗(yàn)的完整檢測(cè)體系。