充質(zhì)干細胞(MSC)培養(yǎng)基選擇及使用常見問題分析

充質(zhì)干細胞（MSC）作為再生醫(yī)學的“明星選手”，其培養(yǎng)質(zhì)量直接決定實驗成敗！而培養(yǎng)基的選擇與操作更是核心中的核心。針對高頻痛點，我們整理了一份超實用指南，助你避開培養(yǎng)雷區(qū)！

01Q:基礎(chǔ)培養(yǎng)基怎么選？DMEM/F12、α-MEM還是低糖DMEM？
A:沒有絕對最優(yōu)，關(guān)鍵看細胞來源和應(yīng)用場景！
骨髓/脂肪來源MSC：經(jīng)典選擇α-MEM（含核苷/維生素，促增殖）
臍帶/胎盤來源MSC：傾向低糖DMEM（更貼近生理微環(huán)境）
需神經(jīng)/成骨分化：可選DMEM/F12（營養(yǎng)更均衡）

02Q:血清必須用胎牛血清（FBS）嗎？能用替代品嗎？
A:FBS仍是主流，但無血清培養(yǎng)是趨勢！

重要提示
若用FBS，必須熱滅活（56℃ 30min）以消除補體影響；轉(zhuǎn)換無血清培養(yǎng)時，需梯度適配（按比例混合新舊培養(yǎng)基過渡）。

03Q:培養(yǎng)基多久換液一次？顏色變黃就要換嗎？
A:看細胞密度，別只看顏色！
活躍增殖期（＜80%密度）：每2-3天換液（即使未變黃）；
高密度/靜止期（＞90%）：每天換液（避免代謝廢物堆積）；
急救場景（pH驟降變橙黃）：立即換液+檢查CO₂濃度！
進階技巧
換液前輕晃培養(yǎng)瓶，觀察細胞貼附穩(wěn)定性——若大量漂浮，警惕污染或消化過度！

04Q:添加劑（bFGF、EGF等）怎么加？現(xiàn)用現(xiàn)配嗎？
A:生長因子必須分裝凍存，避免反復凍融！
配制貼士
用含0.1% BSA的PBS溶解生長因子（減少吸附損失）；
分裝單次用量（如bFGF按5-10ng/ml，每支裝50μl），-80℃保存；
使用前融化后4℃暫存≤1周。

05Q:培養(yǎng)的MSC突然不貼壁/分化異常，是培養(yǎng)基的鍋嗎？
A:可能！但需系統(tǒng)排查→ 按此順序自檢：
1. 培養(yǎng)基：
是否新開瓶？檢測pH值（正常：7.2-7.4）
添加劑是否失活？（換新批次驗證）
2. 操作因素：
消化時間是否過長？（理想狀態(tài)：細胞邊緣卷曲即終止）
傳代比例是否過低？（MSC推薦1:2~1:3，高代次勿低于1:4）
3. 環(huán)境控制：
CO₂濃度是否偏離5%？
水盤是否干涸導致濕度不足？

埃澤思生物依托其獨特的技術(shù)平臺，開發(fā)了大量細胞治療和醫(yī)藥生產(chǎn)用的高值培養(yǎng)基類產(chǎn)品，目前核心產(chǎn)品超過60種，并可實現(xiàn)定制開發(fā)及生產(chǎn)。其中核心產(chǎn)品已經(jīng)完成美國FDA DMF備案以及國家藥品評審中心（CDE）藥物原輔料備案，是國內(nèi)資質(zhì)較為齊全的細胞治療原料供應(yīng)商。

產(chǎn)品推薦
增強型人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基（AC-1001009）

1.高效增殖能力、明顯降低單位細胞生產(chǎn)成本；
2.傳代20代，細胞依然保持良好的形態(tài)與分化能力；
3.無動物源，成分確定，可以明顯減少批間差異，確保每一批次產(chǎn)品的高效能和穩(wěn)定性；
4.符合細胞藥物研發(fā)標準，可以進行藥物研發(fā)申報。

數(shù)據(jù)展示
1.卓越的增殖能力

埃澤思增強型人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基(hMSC Medium Plus)在3天內(nèi)顯著提高了細胞增殖率，細胞數(shù)量達競品的兩倍

2.穩(wěn)定傳代，持久效能

埃澤思增強型人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基(hMSC Medium Plus)經(jīng)過嚴格的測試可以穩(wěn)定傳代20代，并且保持著卓越的增殖和分化能力。

3.流式檢測

埃澤思增強型人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基(hMSC Medium Plus)能夠穩(wěn)定維持高代次陽性標志物在98%以上。圖為P12代人臍帶間充質(zhì)干細胞表面標記物的檢測。

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