
乳清蛋白約占牛奶中所有蛋白質(zhì)的 20%,是乳制品行業(yè)中的一種重要副產(chǎn)物。它不僅營養(yǎng)豐富,更因其易于吸收的特性而備受青睞。乳清蛋白水解物(WPH)則是在酶解技術(shù)的“精準剪裁”下,將大分子蛋白分解成更易吸收的小肽和氨基酸,吸收速度更快、生物利用度更高!憑借出色的消化特性和多種潛在生理功能,WPH已成為運動營養(yǎng)、臨床支持和功能性食品領(lǐng)域的“明星成分”。
酶促水解
•在250 ml反應器中,用4N NaOH將WPC80調(diào)至pH 7,溫度升至50°C后加入酶,維持250 rpm攪拌2小時,隨后在90°C下加熱10min使酶失活。滅活后,將蛋白水解物冷卻至室溫,然后于-80℃下冷凍,隨后凍干以獲得粉末狀水解物以進行進一步實驗。
水解度測定
•使用10 kDa超濾離心管在FC5515R離心機中,以10000 rpm,4℃下離心10分鐘,對透析液中水解肽的濃度進行測定,以計算水解度(DH)。
線蟲處理
•將不同濃度的WPH(250, 300, 350 和 400 μg/mL)施加于含0.5 μg/mL尼羅紅染料的線蟲生長培養(yǎng)基(NGM)平板上,觀察其對線蟲脂肪含量、甘油三酯和膽固醇的影響。
抗氧化活性評價
•評估在H2O2 (2 mM)誘導的氧化壓力下,不同濃度的WPH對線蟲生存率的影響。
神經(jīng)保護實驗
•在轉(zhuǎn)基因C. elegans CL4176中誘導Aβ肽的表達,以研究WPH的神經(jīng)保護作用。
•甘油三酯含量:
與對照組相比,在WPH處理下,線蟲的甘油三酯降低了29.3%(p < 0.05),顯示出類似于與陽性對照奧利司他的效果。
•膽固醇吸收:
WPH顯著降低了線蟲的膽固醇含量(p < 0.01),這一效果與陽性對照依折麥布相當。
•抗氧化活性:
WPH在250 μg/mL濃度下使線蟲在氧化壓力下的存活率相比對照組提高了27%(p < 0.0001)。
•神經(jīng)保護效果:
所有劑量均具有顯著保護效果(p<0.0001)。在400 μg/mL的WPH處理下,誘導30小時,未麻痹的線蟲比例 47.1% 。
通過實驗發(fā)現(xiàn),新型酶解乳清蛋白水解物在調(diào)節(jié)脂質(zhì)、抗氧化甚至神經(jīng)保護方面,都展現(xiàn)出了令人驚喜的潛力!而這一切的背后,離不開奧豪斯FC5515R離心機的穩(wěn)定支持——憑借精準的溫控與高效的離心表現(xiàn),它在超濾步驟中順利區(qū)分出不同分子量的活性肽段,既保障了水解度測定的準確性,也最大程度保留了樣品的生物活性。
我們很高興FC5515R能助力科研團隊取得可靠發(fā)現(xiàn)。為科學研究提供穩(wěn)定、可靠的工具,是奧豪斯始終如一的承諾。期待未來能陪伴更多研究者,共同探索大健康領(lǐng)域的無限可能。
參考文獻
Néstor David Giraldo, Juan David Sánchez, Andrés López, Nuria González, Ferran Balaguer, Jennifer Redondo, Silvia Llopis, Marta Barrena, Bernadette Klotz,
Functional assessment of a whey protein hydrolysate: In vivo responses in lipid regulation, oxidant defense, and neural protection in Caenorhabditis elegans,
International Dairy Journal, Volume 154, 2024, 105921, ISSN 0958-6946,
https://doi.org/10.1016/j.idairyj.2024.105921.