培養(yǎng)基除菌過濾及其它實驗室過濾產品的選用標準
瀏覽次數(shù):816 發(fā)布日期:2025-10-24
來源:洛肯儀器/洛科儀器
培養(yǎng)基除菌過濾需根據(jù)具體需求選擇濾膜材質和孔徑,以下是關鍵要點:
1. 濾膜材質選擇
聚醚砜(PES):親水性好,低蛋白吸附,耐高溫(121℃滅菌),適合細胞培養(yǎng)液、蛋白質溶液等生物樣品。其化學穩(wěn)定性強(pH 1-14),機械強度高,是除菌過濾的首選。
混合纖維素酯(MCE):親水性強,價格低,但耐化學性差(pH 5-10),不耐有機溶劑和強酸堿,適用于水溶液常規(guī)過濾。
醋酸纖維素(CA):低蛋白結合,適合含血清培養(yǎng)基過濾,但耐溫性較差(≤75℃)。
2. 孔徑要求
0.22μm:標準除菌孔徑,可截留99.99%細菌,適用于無菌培養(yǎng)基、注射液等。
0.45μm:用于預過濾或澄清,需配合0.22μm濾膜使用。
3. 操作注意事項
過濾前需潤濕濾膜(PES/MCE用無菌水,CA用乙醇)。
高壓滅菌時需驗證濾膜耐受性(PES可121℃滅菌,MCE需低溫)。
高顆粒樣品建議先經0.8μm濾膜預過濾。
4. 推薦組合
生物制藥/細胞培養(yǎng):PES 0.22μm濾膜(如賽多利斯Sartolab®)。
常規(guī)水溶液:MCE 0.22μm濾膜(成本低)。
選擇換膜過濾器的濾膜需綜合考慮以下關鍵因素:
1. 孔徑選擇
除菌過濾:優(yōu)先選擇0.22μm濾膜,可截留99.99%的細菌(如大腸桿菌、金黃色葡萄球菌)。若需去除支原體(0.1-0.3μm),則需0.1μm超濾膜。
粗濾或預過濾:0.45μm濾膜適合去除大顆粒(如細胞碎片、泥沙),但無法有效截留細菌。粘稠或雜質多的樣品可先用0.8μm濾膜預過濾,避免堵塞。
2. 材質匹配
水系溶液:親水膜(如混合纖維素酯MCE、聚醚砜PES)。
有機溶劑:疏水膜(如聚四氟乙烯PTFE、尼龍NYLON)。
強酸/強堿環(huán)境:耐腐蝕材質(如PTFE、陶瓷膜)。
3. 樣品特性
化學相容性:濾膜需耐受樣品溶劑,避免溶解或吸附目標物(如蛋白質純化推薦低吸附PVDF膜)。
流速需求:高粘度樣品選大孔徑或高孔隙率濾膜(如PES膜流速優(yōu)于纖維素膜)。
4. 操作規(guī)范
預過濾:渾濁樣品建議先用0.45μm濾膜粗濾,延長0.22μm濾膜壽命。
完整性驗證:過濾后需檢查濾膜是否破損,確保截留效果。
5. 特殊場景
無菌檢測:0.22μm濾膜需經微生物挑戰(zhàn)測試(如缺陷短波單胞菌)。
微生物限度檢驗:0.45μm濾膜適用于細菌總數(shù)檢測,0.22μm用于支原體等微小微生物。
總結:根據(jù)過濾目的(除菌/粗濾)、樣品性質(溶劑類型、粘度)及后續(xù)檢測要求(如無菌驗證)綜合選擇孔徑和材質,并注意操作流程優(yōu)化。