基質(zhì)膠使用操作流程及注意事項(xiàng)

一、收到貨后請(qǐng)檢查
1、泡沫箱內(nèi)是否有干冰；
2、基質(zhì)膠是否呈固態(tài)，膠面是否平整；
3、基質(zhì)膠的顏色是否在正常范圍內(nèi)（不含酚紅為白色/乳白色，含酚紅為：黃色-粉紅色-深紅色，由溫度變化決定）；
4、收到貨后如果不是立刻使用基質(zhì)膠，應(yīng)立即將其放進(jìn)-20/-80℃冰箱長(zhǎng)期保存。

二、操作流程說(shuō)明
每次使用基質(zhì)膠前，應(yīng)嚴(yán)格按照以下基質(zhì)膠操作流程說(shuō)明進(jìn)行解凍操作�。。�
1、提前在-20℃下預(yù)冷“基質(zhì)膠冰盒(abs7289)“（或者準(zhǔn)備碎冰）和200μL槍頭盒1個(gè)小時(shí)以上，在傍晚下班前將基質(zhì)膠從-20/-80℃冰箱取出并放入“基質(zhì)膠冰盒“（或?qū)⒒�質(zhì)膠埋于鋪滿碎冰的冰盒）中，然后再將整個(gè)冰盒一起放入4℃冰箱進(jìn)行過(guò)夜解凍；
2、第二天，解凍完成后可進(jìn)行基質(zhì)膠使用。將基質(zhì)膠從4℃冰箱取出，立即放入-20℃預(yù)冷的“基質(zhì)膠分裝冰盒”（碎冰盒）中，隨后在超凈操作臺(tái)/生物安全柜中進(jìn)行無(wú)菌使用；
3、使用時(shí)，取出-20℃預(yù)冷的200μL槍頭，并打開(kāi)基質(zhì)膠瓶蓋（盡可能保證基質(zhì)膠瓶在基質(zhì)膠解凍冰盒上操作）；
4、使用基質(zhì)膠，立即放回冰盒，置于4℃冰箱短期保存即可，兩周內(nèi)使用完畢。

三、必讀的注意事項(xiàng)
1、實(shí)驗(yàn)人員的手心不要直接地接觸基質(zhì)膠部分；
2、整個(gè)使用過(guò)程都要在預(yù)冷的基質(zhì)膠分裝冰盒（碎冰盒）上進(jìn)行，該次實(shí)驗(yàn)用不完的基質(zhì)膠可以放在4℃至多保存兩周；
3、一定不要將基質(zhì)膠直接丟在冰箱中解凍和保存，一定要放在“基質(zhì)膠冰盒“（或?qū)⒒�質(zhì)膠埋于鋪滿碎冰的冰盒）中再放入4度冰箱解凍或保存；此外，不要放在冰箱門(mén)邊解凍或保存，也不要放在經(jīng)常敞開(kāi)口取放試劑的冰箱解凍或保存，盡可能放在4度冰箱靠里面/抽屜內(nèi)/出冷風(fēng)口處解凍或保存；
4、由于基質(zhì)膠對(duì)溫度敏感，故建議使用非除霜型且溫度穩(wěn)定的冰箱進(jìn)行融解、保存，請(qǐng)一定不要在帶有自動(dòng)除霜的冰箱中解凍基質(zhì)膠；
5、如使用碎冰盒過(guò)夜解凍，應(yīng)固定好基質(zhì)膠瓶位置，確保過(guò)夜碎冰融化后基質(zhì)膠瓶不會(huì)傾倒，冰水不會(huì)浸沒(méi)基質(zhì)膠瓶口；
6、基質(zhì)膠使用過(guò)程應(yīng)避免反復(fù)凍融；
7、液體基質(zhì)膠會(huì)在8℃以上快速成膠（特別是高濃度基質(zhì)膠）。因此，使用時(shí)，接觸到基質(zhì)膠的耗材必須預(yù)冷（如移液管、吸頭、EP管等），并且整個(gè)實(shí)驗(yàn)必須在無(wú)菌、冰上操作；
8、使用時(shí)的基質(zhì)膠在冰上應(yīng)呈現(xiàn)液態(tài)，若在冰上使用時(shí)基質(zhì)膠已經(jīng)凝固，說(shuō)明分裝操作未能保持低溫，導(dǎo)致基質(zhì)膠已經(jīng)成膠，不宜再使用；
9、如果發(fā)現(xiàn)放置在4度冰箱中基質(zhì)膠很粘稠，但還是液態(tài)，可以將其放入一個(gè)-20℃預(yù)冷的冰盒中，放入-20℃冰箱靜置3-5min，流動(dòng)性一般都會(huì)恢復(fù)正常；如果不能恢復(fù)，則可能為冰箱溫度太高導(dǎo)致凝膠，建議不要使用。

四、Q&A
Q1：為什么我的基質(zhì)膠很粘稠？
A1：基質(zhì)膠的蛋白濃度越高，膠體越粘稠。如果濃度高于13.0mg/mL，基質(zhì)膠會(huì)顯得非常濃稠。基質(zhì)膠產(chǎn)品在未稀釋前都會(huì)比較粘稠。粘稠的高濃度基質(zhì)膠不稀釋也可以直接使用，如用于培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞和/或血管生成因子，注射于小鼠體內(nèi)后，細(xì)胞可以保持原位，便于原位分析和/或以后的切除；或者稀釋后，按照標(biāo)準(zhǔn)濃度的基質(zhì)膠產(chǎn)品使用方法使用，具體稀釋濃度根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求確定。

A2：除因?yàn)楫a(chǎn)品本身濃度高而粘稠外，基質(zhì)膠的狀態(tài)還與運(yùn)輸過(guò)程中溫度的變化和儲(chǔ)藏條件有關(guān)。整個(gè)運(yùn)輸過(guò)程中必須使用干冰運(yùn)輸。如果儲(chǔ)藏基質(zhì)膠的冰箱帶有自動(dòng)除霜功能，冰箱除霜過(guò)程中升溫，可能使基質(zhì)膠成膠。所以，切忌將基質(zhì)膠儲(chǔ)藏于此類帶有自動(dòng)除霜的冰箱中。為保證基質(zhì)膠的使用效果，凍融次數(shù)應(yīng)該盡可能減少。特別注意：水的溫度傳遞、冰的溫度傳遞、冰水的溫度傳遞和空氣的溫度傳遞不同，空氣溫度傳遞特別慢和溫度分布不均一，因此基質(zhì)膠解凍不能直接丟在2-8度冰箱解凍，一定要放在冰盒/冰水混合物中，再放入0-4℃的冰箱解凍。

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