瑞孚迪HTRF/Alpha檢測試劑盒的核心優(yōu)勢及原理

阿爾茨海默病的記憶消逝、帕金森病的顫抖、亨廷頓病的失控運動……這些神經(jīng)退行性疾病的背后，是特定蛋白質(zhì)的錯誤折疊、異常聚集和細(xì)胞信號通路紊亂。傳統(tǒng)的檢測方法如WB、ELISA往往存在過程繁瑣、通量低、靈敏度受限等問題，難以滿足前沿科研與藥物研發(fā)對精度和效率的極致追求。

在這場攻堅戰(zhàn)中，瑞孚迪（Revvity）的HTRF和Alpha檢測技術(shù)脫穎而出，成為科學(xué)家們手中直擊核心病理的“狙擊鏡”，為揭開疾病奧秘、開發(fā)有效療法提供了關(guān)鍵工具。

核心技術(shù)優(yōu)勢：為何是“狙擊鏡”？

HTRF：分子尺度的“精準(zhǔn)測距”

通過熒光共振能量轉(zhuǎn)移原理，只有當(dāng)兩種特異性抗體都結(jié)合目標(biāo)蛋白而靠近時，才會產(chǎn)生特定信號。其“時間分辨”特性有效過濾背景熒光，實現(xiàn)高信噪比的檢測需求。

圖一. HTRF檢測原理圖

Alpha：超靈敏的“信號放大器”

基于均相鄰近化學(xué)發(fā)光原理，通過級聯(lián)反應(yīng)放大信號，從而提高檢測靈敏度，尤其擅長在復(fù)雜樣本中捕捉極低含量的致病蛋白寡聚體或磷酸化蛋白。

圖二. Alpha檢測原理圖

它們的共同優(yōu)勢在于：

• 均相檢測：“混合即讀”，無需洗滌，極大簡化流程，完美適配高通量篩選。
• 高靈敏度與特異性：雙抗模型能夠特異性檢測復(fù)雜生物樣本（如腦脊液）中極低濃度的目標(biāo)分子（可達飛摩爾級別）。
• 定量精準(zhǔn)：提供穩(wěn)定、可靠的數(shù)據(jù)，為科學(xué)決策奠定堅實基礎(chǔ)。

直擊靶心：鎖定三大神經(jīng)退行性病變的“元兇”

1.阿爾茨海默病（AD）：追擊Aβ與Tau兩大“真兇”

AD 的核心病理特征是 β 淀粉樣蛋白（Aβ）沉積形成的斑塊和 Tau 蛋白過度磷酸化形成的神經(jīng)纖維纏結(jié)。

精準(zhǔn)定量Aβ亞型：

利用均相 Aβ (1-40) 和 (1-42) 檢測試劑盒，研究人員即可直接、靈敏地檢測細(xì)胞模型、腦脊液乃至血漿中的Aβ水平。精確測定Aβ42或Aβ40的含量，對于評估疾病風(fēng)險、監(jiān)測藥物療效至關(guān)重要。

圖三. AlphaLISA Aβ(1-42)試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線和交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)

解析Tau蛋白病理：

Tau蛋白在特定位點（如S396, T181）的磷酸化是其功能失常的關(guān)鍵。Total Tau 和 Phospho-Tau 檢測試劑盒能夠在一份樣本中測定總Tau和磷酸化Tau的水平，為評估Tau病理嚴(yán)重程度和篩選激酶抑制劑提供了工具。

圖四. HTRF Total Tau 和 Phospho-Tau 試劑盒在腦脊液中的應(yīng)用和化合物抑制曲線

2. 帕金森�。罕O(jiān)控α-突觸核蛋白的“黑化”與LRRK2的“失控”

探測α-突觸核蛋白早期聚集：

α-突觸核蛋白的寡聚化是PD神經(jīng)毒性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。均相檢測技術(shù)因其超高靈敏度，是檢測α-突觸核蛋白聚集的理想平臺，能夠高效篩選出能阻止該蛋白“變壞”和聚集的小分子抑制劑。

 

圖五.Alpha α-突觸核蛋白聚集檢測試劑盒特異性和HTRF稀釋比例數(shù)據(jù)

靶向致病激酶LRRK2：

LRRK2 是帕金森病及相關(guān)神經(jīng)退行性疾病研究中的重要靶點。均相檢測試劑盒能夠直接評估LRRK2的磷酸化水平，極大地加速了LRRK2抑制劑藥物的篩選與藥理表征進程。

圖六. HTRF LRRK2 Ser935磷酸化檢測試劑盒方法學(xué)對比和化合物抑制曲線

3. 亨廷頓�。禾禺愋�“追蹤”突變亨廷頓蛋白

亨廷頓病是一種常染色體顯性遺傳的神經(jīng)退行性疾病。發(fā)病機制是由于亨廷頓基因中的 CAG 三核苷酸異常擴增，產(chǎn)生了突變的亨廷頓蛋白（mHTT），導(dǎo)致神經(jīng)功能退化。

實現(xiàn)mHTT特異性檢測：

均相檢測技術(shù)可以特異性地識別并定量致病的突變亨廷頓蛋白，而幾乎不與正常的亨廷頓蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)，可以有效評估大腦中mHTT蛋白的水平。

圖七. HTRF total HTT檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線和小鼠模型檢測數(shù)據(jù)

賦能藥物研發(fā)：從靶點驗證到臨床評估

在針對上述疾病的藥物研發(fā)過程中，HTRF和Alpha技術(shù)提供了全流程支持：

高通量篩選： 快速掃描數(shù)百萬化合物庫，發(fā)現(xiàn)能減少Aβ產(chǎn)生、抑制Tau磷酸化或阻止α-syn聚集等的先導(dǎo)化合物。

藥效學(xué)評估： 在細(xì)胞和動物模型中，精確量化藥物處理后病理蛋白水平的下降程度。

生物標(biāo)志物分析： 在臨床前和臨床研究中，定量分析患者腦脊液中的生物標(biāo)志物變化，為藥物有效性提供最直接的證據(jù)。

結(jié)論

神經(jīng)退行性疾病的戰(zhàn)爭，是在分子尺度上進行的。瑞孚迪的HTRF與Alpha技術(shù)，正是這樣一套能夠直擊戰(zhàn)場核心的精密成像系統(tǒng)與精準(zhǔn)制導(dǎo)武器。通過鎖定Aβ、Tau、α-syn等核心致病蛋白，幫助全球科學(xué)家更快地揭開疾病謎團，并將有希望的療法推向臨床，為無數(shù)患者和家庭帶來曙光。