LVV體內(nèi)遞送平臺(tái)技術(shù)格局、策略優(yōu)劣勢(shì)和市場定位分析

文章來源公眾號(hào)：VTALK       作者：VTALK

第 1 部分：技術(shù)格局分析
1.1平臺(tái)對(duì)比矩陣

注：update to 2025。 

Kelonia Therapeutics 正在開發(fā)一種創(chuàng)新的體內(nèi)基因編輯系統(tǒng) （iGPS） 平臺(tái)，用于直接在患者體內(nèi)生成 CAR-T 細(xì)胞。 iGPS 平臺(tái)是通過復(fù)雜的病毒載體工程開發(fā)的：
·去靶向天然受體：對(duì) VSV-G（水皰性口炎病毒糖蛋白）包膜進(jìn)行修飾，以消除與其天然受體 LDL-R（低密度脂蛋白受體）的結(jié)合 
·T 細(xì)胞特異性靶向：摻入抗 CD3 單鏈可變片段 （scFv） 以為 T 細(xì)胞提供特異性趨向性 
·優(yōu)化過程：篩選了多個(gè) VSV-G 變體，以確定那些：
·最佳抑制 LDL-R 結(jié)合
·保持有效的 T 細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)能力

1.2 技術(shù)準(zhǔn)備評(píng)估
·臨床驗(yàn)證：ESO-T01 （BCMA） —  《柳葉刀》上第一個(gè)經(jīng)過同行評(píng)審的體內(nèi) CAR-T 病例系列 （RRMM）;ENaBL顆粒設(shè)計(jì)（MHC-I–/CD47+/TCRαβ VHH;T細(xì)胞特異性啟動(dòng)子）在臨床補(bǔ)充劑中公開。

·臨床（I 期活性/啟動(dòng)）階段：Umoja （CD19+RACR） 和 Interius （INT2104，CD7 靶向抗 CD20）——均已進(jìn)入人體臨床研究。Kite 宣布有意收購 Interius; 艾伯維選擇了 Umoja 的 UB-VV111進(jìn)行開發(fā)合作，UB-VV111于日前獲得FDA的FTD（fast track designation）。 

·臨床前階段：Sana — 具有 NHP 特異性的 CD8 靶向副粘病毒融合體系統(tǒng)(Paramyxoviral)，與早期構(gòu)建的fusogen相比，滴度更高，能夠減少劑量; Kelonia — 初步展現(xiàn)的 NHP 藥理數(shù)據(jù)和計(jì)劃于 2025 年公布的去靶向 VSV-G CD3 管線。 

·早期臨床前：Exuma、Ensoma （VLP 多譜系體內(nèi)工程）和其他進(jìn)入者。 

第二部分：策略優(yōu)劣勢(shì)分析
2.1 靶向策略分析（CD3、CD4、CD8、CD7、TCRαβ）
·CD3
o優(yōu)點(diǎn)： 廣泛的泛-T攝取（CD4/CD8），強(qiáng)大的激活協(xié)同作用（例如，Umoja的CD3 + CD80 / CD58 APC模擬物）;在臨床前/大型動(dòng)物環(huán)境中的穩(wěn)健轉(zhuǎn)導(dǎo)。 
o缺點(diǎn)： 如果激活太強(qiáng)，更廣泛的趨向性會(huì)增加細(xì)胞因子激增的風(fēng)險(xiǎn);如果沒有護(hù)欄，則有可能轉(zhuǎn)導(dǎo) T 細(xì)胞腫瘤中的惡性 T 細(xì)胞。
o治療指標(biāo)： 有利于快速 T 細(xì)胞擴(kuò)增;使用 VivoVec 觀察到循環(huán) T 細(xì)胞的 NHP 峰值高達(dá) ~65% CAR-T。 
o定位： 較多玩家的競爭（Umoja、Kelonia、Genocury、Exuma）——通過APC 模擬與隱身功能和安全導(dǎo)軌進(jìn)行區(qū)分。

·CD4
o優(yōu)點(diǎn)： 輔助性 T 細(xì)胞偏倚;在某些情況下可以避免惡性 CD8+ 克隆的轉(zhuǎn)導(dǎo)。
o缺點(diǎn)：CD4+ T 細(xì)胞惡性腫瘤的風(fēng)險(xiǎn);輔助偏倚可能會(huì)降低直接細(xì)胞毒性分?jǐn)?shù)。
o證據(jù)： 副粘病毒 NiV 重定向框架允許在臨床前工作中進(jìn)行 CD4 特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)。 

·CD8
o優(yōu)點(diǎn)：選擇性遞送至細(xì)胞毒性T細(xì)胞;Sana CD8 fusogen的臨床前/NHP數(shù)據(jù)顯示出很強(qiáng)的特異性和淋巴器官靶向性;可避免在T細(xì)胞惡性腫瘤中將CAR遞送至CD4+惡性細(xì)胞。
o缺點(diǎn)：無輔助T細(xì)胞支持，可能需要共同刺激或細(xì)胞因子支持才能持續(xù)存在。
o定位： 對(duì)B細(xì)胞癌具有很強(qiáng)的擬合性，具有安全優(yōu)勢(shì);利用副粘病毒 pH值不依賴的 進(jìn)入優(yōu)勢(shì)（第2.2節(jié)）。

·CD7
o優(yōu)點(diǎn)：廣泛的 T/NK 覆蓋范圍 （Interius），支持多效應(yīng)器 CAR 種群。去靶向的 VSV-G 變體 （Gen2.1） 增強(qiáng)持久性并減少意外的 LDLR 結(jié)合。 
o缺點(diǎn)： 正常 T/NK 中 CD7 抗原表達(dá)增加了復(fù)雜性;離體潛在的自相殘殺（When a CAR targets a T-cell antigen (e.g., CD7, CD5, TRBC1/2), engineered T cells kill themselves or each other during manufacturing because they express the same antigen they’re meant to attack. Result: poor cell yields, unstable products, or the need for edits/PEBLs/knockdowns to remove）不適用于此，但生物學(xué)仍然相關(guān);需要仔細(xì)的安全門控。

·TCRαβ（恒定區(qū)）
o優(yōu)點(diǎn)： 靶向常規(guī) αβ T 細(xì)胞，無論子集如何;與 MHC-I–/CD47+ 隱形涂層和 T 細(xì)胞特異性 啟動(dòng)子 （ESO-T01） 配對(duì)以限制非 T 表達(dá)。 
o缺點(diǎn)： Pan-T 與 CD3 一樣到達(dá);在很大程度上依賴 啟動(dòng)子特異性和 包膜隱蔽性來防止脫靶轉(zhuǎn)導(dǎo)和先天清除。
o臨床信號(hào)：通過該設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)的第一個(gè)經(jīng)過同行評(píng)審的人體療效/安全性信號(hào) （Esobiotech）（RRMM）。

2.2 Fusogen進(jìn)入機(jī)制（pH 依賴性 VSV 譜系與 pH 依賴性副粘病毒）
·特異性和脫靶
o副粘病毒（NiV/麻疹衍生）：質(zhì)膜融合與受體結(jié)合偶聯(lián)，→體內(nèi)  VSV-G 家族可見的更高的靶向特異性和減少的非特異性內(nèi)體攝取。
oVSV 譜系（VSV-G / cocal 變體）： 高滴度和成熟的 GMP，但 pH 依賴性 內(nèi)體融合可以允許 非特異性攝取; 緩解措施包括 去靶向 VSV-G（通過引入多個(gè)具有氨基酸取代的 VSV-G 變體，例如 Interius Gen2.1）和血清耐藥 cocal（Umoja Biopharma 的 VivoVec 平臺(tái) 使用 Cocal 病毒融合糖蛋白 而不是傳統(tǒng)的包膜蛋白）。

·CMC挑戰(zhàn)
oVSV 譜系：通常滴度最高，規(guī)模穩(wěn)健，純化成熟;有吸引力的 COG。 
o副粘病毒：歷史上較低的滴度;Sana 報(bào)告稱，滴度/工藝進(jìn)步 50×，可在保持特異性的同時(shí)減少劑量。 

·臨床應(yīng)用特征
oVSV 系列現(xiàn)在利用對(duì)  GMP 的熟悉度，有多個(gè)已經(jīng)進(jìn)入臨床開發(fā)階段的LVV in vivo CAR T產(chǎn)品（Umoja、Interius）。 
o副粘病毒 CD8 fusogen 平臺(tái)具有 NHP 特異性和生物分布優(yōu)勢(shì)（報(bào)告肝臟信號(hào)降低），支持進(jìn)一步開發(fā)。 

·創(chuàng)新潛力
o副粘病毒系統(tǒng)對(duì)于受體重定向具有高度模塊化;VSV 譜系可以去靶向工程化處理（Kelonia、Interius）結(jié)合。 

2.3 多功能Envelop工程
·APC 模擬 （Umoja）：載體顯示抗 CD3 + CD80/CD58，在一個(gè)顆粒中提供結(jié)合 + 激活 + 轉(zhuǎn)導(dǎo) — 加速 T 細(xì)胞原位啟動(dòng)，但提出了細(xì)胞因子管理考慮因素。 
·免疫隱身（EsoBiotec）：MHC-I-包膜加CD47逃避吞噬作用，降低清除率/先天攝取;與T細(xì)胞特異性啟動(dòng)子配對(duì)抑制非T表達(dá)。 
·多譜系（Ensoma VLP）： 靶向 CD46 的 VLP 旨在 HSC 產(chǎn)生多譜系效應(yīng)子;CAR-T 處于早期階段，但有可能擴(kuò)展到 T 細(xì)胞之外。 
權(quán)衡：增加的envelope功能增加了 CMC 的復(fù)雜性（分析、一致性），而不是明顯的治療益處（快速激活與隱身和持久性）。Umoja 和 EsoBiotec 說明了不同的、可防御的護(hù)城河（APC 模擬與隱形啟動(dòng)子+CD47）。

2.4 脫靶效應(yīng)減少策略
ü受體靶向fusogen/binding domain（CD8/CD3/CD7/TCRαβ） —  特異性的主要驅(qū)動(dòng)因素。 
ü副粘病毒進(jìn)入（受體偶聯(lián)，非pH依賴），以避免  VSV-G 出現(xiàn)的內(nèi)體非特異性攝取。
ü去靶向的 VSV-G + 結(jié)合劑 （Kelonia、Interius）可減少天然 LDLR 結(jié)合;保留強(qiáng)滴度。 
ü包膜上的 CD47 （和 MHC-I 減少）以減少 吞噬作用匯 和先天攝�。‥SO-T01;也普遍用于 LV）。 
üT 細(xì)胞特異性啟動(dòng)子（以及 2025 年摘要報(bào)告中的新型合成啟動(dòng)子）以最大限度地減少  整合后的非 T 表達(dá)。
ü防止載體顆粒上的 CAR 殘留 （VSV-G 的主要脫靶風(fēng)險(xiǎn)）：2025 年“第四代”LVV基因組 + TRiP + 2KO 消除了顆粒中可檢測的 CAR ，并減少了異常的 vRNA 剪接。 

üCAR 殘留是指在制造過程中慢病毒 （LV） 顆粒上/中意外存在 CAR 蛋白（和/或編碼 CAR 的剪接病毒 RNA）。當(dāng)這些顆粒用 VSV-G 進(jìn)行假分型時(shí)，病毒粒子表面的 CAR 可以將其抗原結(jié)合在非 T 細(xì)胞上并重新靶向載體，從而驅(qū)動(dòng)脫靶轉(zhuǎn)導(dǎo)，而不受預(yù)期的融合原趨向性的影響。這種現(xiàn)象已被明確標(biāo)記為 VSV-G 系統(tǒng)的安全風(fēng)險(xiǎn)：CAR 蛋白可以在 LV 生產(chǎn)過程中摻入載體顆粒中，并且當(dāng)與 VSV-G 融合劑結(jié)合時(shí)，已被證明可以驅(qū)動(dòng)脫靶轉(zhuǎn)導(dǎo)。

ü重要性：向攜帶抗原的旁觀者細(xì)胞（例如 B 細(xì)胞、髓系細(xì)胞或腫瘤組織）脫靶遞送會(huì)產(chǎn)生可避免的插入風(fēng)險(xiǎn)，并可能混淆生物分布、效力和安全性讀數(shù)。pH 依賴性內(nèi)體進(jìn)入途徑（VSV-G 譜系）已經(jīng)容易發(fā)生非特異性攝取;在顆粒上添加 CAR 會(huì)進(jìn)一步破壞特異性。

ü2025年“第四代”修復(fù)：2KO+TRiP（帶TRAP/tbs）：
ü2KO 基因組：第四代LVV基因組 （SupA2KO-LV），可滅活 MSD 驅(qū)動(dòng)的剪接，消除那些編碼 CAR 的剪接 vRNA。 

üTRiP系統(tǒng)：將TRAP結(jié)合序列（tbs）插入CAR 5′ UTR（與Kozak / ATG重疊）并在  生產(chǎn)者系中表達(dá)TRAP;TRAP 結(jié)合結(jié)核病并抑制生產(chǎn)細(xì)胞中的 CAR 翻譯，防止 CAR 蛋白出現(xiàn)在生產(chǎn)者膜上（從而出現(xiàn)在出芽顆粒上）。

ü使用該第四代構(gòu)建物重靶 NiV-糖蛋白 LV（pH 不依賴入口）顯示出更高的 T 細(xì)胞特異性， 并 避免了 VSV-G 載體在體內(nèi)看到的脫靶信號(hào)（例如，骨髓/肝臟攝�。�。

·藥物聯(lián)合治療：目標(biāo)：在LVV給藥時(shí)瞬時(shí)提高靶向轉(zhuǎn)導(dǎo)和安全性，而不影響以后的CAR-T擴(kuò)增/功能。

ü兩個(gè)互補(bǔ)boost：
l雷帕霉素（mTORC1 抑制劑）→改善  T 細(xì)胞內(nèi)的載體進(jìn)入/運(yùn)輸。
l達(dá)沙替尼 （Src/Lck 酪氨酸激酶抑制劑）→ 抑制 TCR 信號(hào)傳導(dǎo)，阻止 CD3 內(nèi)化，減少急性細(xì)胞因子釋放，并可以暫時(shí)“暫停”CAR 活性。

第 3 部分：競爭格局和市場定位
3.1 臨床證據(jù)層次結(jié)構(gòu)
一.ESO-T01 / AZ — 第一個(gè)經(jīng)過同行評(píng)審的 MM 臨床 PoC;設(shè)計(jì)包括 MHC-I–/CD47+ 包膜和 T 細(xì)胞特異性啟動(dòng)子。 
二.遺傳學(xué) — 使用VZV-G逆轉(zhuǎn)錄病毒載體和抗CD3結(jié)合劑的IIT首次患者報(bào)告（iit first-patients report， DLBCL  ）;PR → CR 更新 3 個(gè)月。
三.Umoja — I 期活性 （CD19+RACR）;強(qiáng)大的 NHP 經(jīng)驗(yàn);艾伯維選項(xiàng)驗(yàn)證。 
四.Interius （Kite） — CD7 靶向 LV + 改良 VSV-G 的 I 期;Kite 的收購表明對(duì)平臺(tái)的信念。 
五.Kelonia — 晚期臨床前，NHP B 細(xì)胞耗竭強(qiáng)勁，濃度為 10^8 vp/kg，毒性低; IND 就。
六.Sana — 具有 NHP CD8 靶向和特異性生物分布的高級(jí)臨床前; 制造效率提高。 
七.Ensoma/Exuma — 早期臨床前（分別為VLP和CD3-LV）。 

3.2 適應(yīng)癥策略擬合度
·血液系統(tǒng)惡性腫瘤（B 細(xì)胞）：跨平臺(tái)最強(qiáng)擬合; CD19/22，由 NHP 和早期臨床信號(hào)（Umoja、Interius、Kelonia、ESO-T01）支持的 BCMA  靶點(diǎn)。
·T細(xì)胞惡性腫瘤：CD8靶向 方法有助于避免轉(zhuǎn)導(dǎo)惡性CD4細(xì)胞;存在臨床前支持。 
·實(shí)體瘤： 早期（Ensoma 抗 HER2 VLP 臨床前）;TME 障礙仍然存在;可能需要裝甲/連擊。 
·自身免疫： 興趣日益濃厚（例如，自身免疫的Interius路線圖）;安全標(biāo)準(zhǔn)高;啟動(dòng)子/包膜特異性至關(guān)重要。 

3.3 未滿足的需求和空白
·VSV 譜系系統(tǒng)的穩(wěn)健脫靶硬化（脫靶向之外）→采用 TRiP/2KO 基因組和啟動(dòng)子對(duì)照。 
·肝臟和巨噬細(xì)胞 → CD47 和抗吞噬涂層;進(jìn)一步的生物分布調(diào)整。 
·用于適應(yīng)癥定制的子集選擇性遞送（CD8 與 CD3/CD7）; 雙靶點(diǎn)有效載荷以減輕抗原逃逸。
·實(shí)體瘤鎧甲裝配和 組合 策略（檢查點(diǎn)/趨化因子）仍處于早期體內(nèi)形式。

第 4 部分：關(guān)鍵挑戰(zhàn)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估
4.1 安全
·CRS/ICANS： 激活前向包膜 （APC-mimic） 需要仔細(xì)劑量和托珠單抗/標(biāo)準(zhǔn)措施（見于 NHP）。 
·插入誘變： 根據(jù)綜合 LV 標(biāo)準(zhǔn)（監(jiān)管預(yù)期）進(jìn)行長期隨訪。
·長期的靶向效應(yīng)： CD19/BCMA 計(jì)劃預(yù)計(jì)會(huì)出現(xiàn) B 細(xì)胞發(fā)育不全（根據(jù)需要使用 Ig 替代療法進(jìn)行管理）。
·免疫原性和再給藥： 包膜/結(jié)合劑免疫原性和抗載體免疫需求計(jì)劃（副粘病毒與 VSV 譜系貿(mào)易）。

4.2 功效
·轉(zhuǎn)導(dǎo)變異性：副粘病毒受體偶聯(lián)進(jìn)入提高了 特異性; 混合包膜 NiV（75% 重靶向 + 25% 非靶向）可提高 T 細(xì)胞進(jìn)入和效率。 
·擴(kuò)展和持久性： VivoVec 在 NHP 中顯示出強(qiáng)勁的峰值和二次擴(kuò)展;RACR 提供藥物控制。 
·抗原逃逸： 考慮LVV cargo中的早期雙抗原（例如 CD19+CD22）設(shè)計(jì)。
·TME（實(shí)體瘤）： 挑戰(zhàn)較大

4.3 制造與可擴(kuò)展性
·滴度/產(chǎn)量： VSV 譜系最高;副粘病毒滴度 改善 （Sana）。 
·血清穩(wěn)定性和配方：Cocal 涂層支持直接輸液; 隱身 功能。 
·GMP 復(fù)雜性： 多域包絡(luò)和工程生產(chǎn)線 （ENaBL-TT） 增加了分析/控制需求。 
·規(guī)模：Umoja已經(jīng)進(jìn)行規(guī)�；�生產(chǎn)的準(zhǔn)備，從自體細(xì)胞治療到真正現(xiàn)貨型治療是質(zhì)的飛躍