從檢測原理到儀器選型，不溶性微粒檢測方法的全攻略梳理

• 高速高效：分析速度快，數(shù)分鐘內(nèi)即可完成一個樣品的檢測和數(shù)據(jù)分析。
• 精準(zhǔn)計數(shù)：可提供精確的粒徑分布和顆粒計數(shù)，滿足藥典的定量要求。
• 自動化程度高：易于集成自動進樣器，實現(xiàn)大批量樣品的無人值守檢測。
• 數(shù)據(jù)完整性好：現(xiàn)代儀器軟件通常符合GMP/GLP規(guī)范，確保數(shù)據(jù)可追溯、不可篡改。

• 對樣品性狀敏感：對于乳濁液、脂質(zhì)體等本身對光有較強散射或吸收的樣品（如乳劑、有色溶液），檢測背景高，信噪比差，結(jié)果易受干擾。
• 形狀假設(shè)：原理上假設(shè)顆粒為球形，對于纖維狀、片狀等非球形顆粒，其等效粒徑與真實尺寸可能存在偏差。
• 重合效應(yīng)：在高濃度樣品中，多個顆�？赡芡瑫r通過檢測區(qū)，被誤判為一個大顆粒，需要儀器具備自動稀釋或重合誤差校正功能。

• 運作原理：將一定體積的樣品溶液通過真空抽濾，使其中的不溶性微粒被截留在特定孔徑的微孔濾膜上。然后將濾膜干燥，置于顯微鏡下，由操作人員人工觀察、計數(shù)并測量微粒的尺寸。

• 直觀可靠：可直接觀察到微粒的真實形貌、顏色和狀態(tài)，有助于進行異物來源的調(diào)查和根因分析。
• 通用性強：幾乎適用于所有類型的樣品，尤其適用于光阻法難以檢測的乳劑、粘稠、有色或不透明的溶液。
• 方法權(quán)威：作為仲裁方法，當(dāng)其他方法結(jié)果有爭議時，以顯微法結(jié)果為最終判斷依據(jù)。

• 效率極低：操作流程繁瑣，包括過濾、干燥、轉(zhuǎn)移、計數(shù)等多個步驟，耗時耗力。
• 主觀性強：結(jié)果嚴(yán)重依賴操作人員的經(jīng)驗和判斷，不同操作者之間的重現(xiàn)性較差。
• 統(tǒng)計代表性不足：由于是人工計數(shù)，通常統(tǒng)計的微粒數(shù)量有限，可能影響結(jié)果的統(tǒng)計學(xué)意義。

• 運作原理：樣品懸浮在電解液中，在負壓作用下流過一個小孔。小孔兩側(cè)各有一個電極。當(dāng)每個不導(dǎo)電的微粒通過小孔時，會瞬間排開相同體積的電解液，導(dǎo)致小孔兩側(cè)的電阻發(fā)生躍變，產(chǎn)生一個電脈沖。脈沖的次數(shù)代表顆粒的個數(shù)，脈沖的幅度與微粒的體積成正比。

• 分辨率極高：能夠清晰區(qū)分粒徑非常接近的顆粒，精度優(yōu)于光阻法。
• 原理直接：測量結(jié)果直接與顆粒體積相關(guān)，不受顆粒光學(xué)性質(zhì)、顏色、形狀（假設(shè)為球形）的影響。

• 樣品要求苛刻：必須懸浮在導(dǎo)電的電解液中，且電解液需要與樣品相容，不引起變化。
• 易堵塞：小孔非常精細，樣品中的大顆粒或纖維極易造成堵塞。
• 粒徑范圍受限：小孔尺寸決定了其檢測的粒徑范圍，更換不同孔徑的小孔可以改變量程，但操作不便。

二、 檢測方法與藥典需求的匹配 
當(dāng)前藥典（如USP <788>、ChP 0903）的核心要求是針對注射劑，測定≥10μm和≥25μm的微粒濃度限度。三種方法與藥典需求的匹配關(guān)系如下：

• 光阻法是主力軍：​ 因其高效、精準(zhǔn)和良好的數(shù)據(jù)完整性，成為絕大多數(shù)透明溶液制劑進行常規(guī)質(zhì)控和放行的首選方法。儀器制造商（如美國PSS、國內(nèi)的胤煌科技等）的設(shè)備均以確保通過藥典的系統(tǒng)適用性試驗為核心設(shè)計目標(biāo)。
• 顯微計數(shù)法是必要的補充和仲裁者：​ 當(dāng)樣品不適用于光阻法時，藥典規(guī)定需采用顯微計數(shù)法。自動化顯微系統(tǒng)的出現(xiàn)（如胤煌科技的產(chǎn)品），通過機器視覺技術(shù)部分克服了傳統(tǒng)方法的劣勢，使其重新成為可靠的選項。
• 庫爾特法是特定領(lǐng)域的專家：​ 藥典中未將其列為注射劑微粒檢測的常規(guī)方法，但其高精度特性使其在疫苗、細胞治療產(chǎn)品等生物制劑的顆粒表征中發(fā)揮重要作用。