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DSP空間多組學(xué)技術(shù)的常見問題及項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

瀏覽次數(shù):361 發(fā)布日期:2025-9-17  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

上期我們分享了“空間組學(xué)樣本制備指南 | 打造完美切片:DSP技術(shù)樣本處理全攻略
本期我們將大家常見的問題以及項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)為大家整理成了FAQ,趁熱打鐵與您分享!

1、DSP(Digital Spatial Profiling)是一個(gè)空間多組學(xué)技術(shù),這些組學(xué)可以同時(shí)檢測嗎?具體包含哪些組學(xué)呢?
答:可以在一張切片同時(shí)檢測轉(zhuǎn)錄組和蛋白組。包含哪些具體組學(xué)產(chǎn)品見下圖1。

2、ROI和AOI有什么區(qū)別呢?
答:在 Digital Spatial Profiling (DSP) 技術(shù)中,ROI(Region of Interest)是指在組織切片上由研究者根據(jù)形態(tài)學(xué)特征或標(biāo)記物選擇的感興趣區(qū)域,是進(jìn)行空間分子分析的總體框架。

AOI(Area of Illumination/Analysis)則是 ROI 內(nèi)部進(jìn)一步定義的分析單元,代表實(shí)際進(jìn)行熒光照射、寡核苷酸釋放及分子信息采集的空間范圍。

換言之,ROI 是“宏觀選區(qū)”,決定研究的整體區(qū)域;AOI 是“微觀劃分”,決定數(shù)據(jù)獲取的精細(xì)尺度。二者的合理結(jié)合可實(shí)現(xiàn)從組織結(jié)構(gòu)層面到分子分辨層面的空間多組學(xué)解析。(具體可全選圈選模式見下圖2)

3、DSP成像marker可以自由選擇嗎?
答:不完全自由,主要受熒光通道的限制。DSP主要包含以下四種熒光通道:

通道名稱

典型代表熒光染料或用途

激發(fā)波長(峰值 ± 帶寬)

發(fā)射波長(峰值 ± 帶寬)

說明

FITC / 525 nm

Alexa Fluor 488, SYTO 13(DNA 染色)

480 ± 28 nm

516 ± 23 nm

常用于 DNA 染色(如 SYTO 13),無需用 DAPI,否則會損壞條碼

Cy3 / 568 nm

AF532, Cy3, PE, TRITC

538 ± 19 nm

564 ± 15 nm

可用于細(xì)胞標(biāo)記與結(jié)構(gòu)識別

Texas Red / 615 nm

AF594, Texas Red, DyLight594

588 ± 19 nm

623 ± 30 nm

用于中紅光區(qū)染色標(biāo)記

Cy5 / 666 nm

AF647, Cy5, DyLight650

645 ± 19 nm

683 ± 30 nm

信噪比高,適合低豐度靶點(diǎn)檢測

4、DSP實(shí)際圈選的界面怎么操作?
答:
(1)ROI/AOI圈選主界面。



(2)ROI圈選模式-多種可選

   
(3)ROI菜單(根據(jù)形狀)
ROI菜單內(nèi)容:①ROI名稱、坐標(biāo)及尺寸;②圈選面積&包含核數(shù);③備注等其他信息(可選);④AOI信息(可選);⑤不超過660×770μm

 

(4)AOI菜單(根據(jù)顏色)
AOI定義:通道之間的邏輯運(yùn)算;
通道閾值是所有ROI通用

 

(5)渲染設(shè)置內(nèi)容:
①M(fèi)in&Max:明暗度和對比度;
②不同樣本或ROI可靈活調(diào)整
“空間維度+多組學(xué)”-高分中標(biāo)公式!



本期分享挑選了top問題進(jìn)行解答,若您對DSP有其他疑問,請隨時(shí)聯(lián)系小備~

注:本文所用圖片均來源于樂備實(shí),版權(quán)歸其所有,請勿擅自挪用。

樂備實(shí)是國內(nèi)專注于提供高質(zhì)量蛋白檢測以及組學(xué)分析服務(wù)的實(shí)驗(yàn)服務(wù)專家,自2018年成立以來,樂備實(shí)不斷尋求突破,公司的服務(wù)技術(shù)平臺已擴(kuò)展到單細(xì)胞測序、空間多組學(xué)、流式檢測、超敏電化學(xué)發(fā)光、Luminex多因子檢測、抗體芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫組化、DSP空間多組學(xué)等30多個(gè),建立起了一套涵蓋基因、蛋白、細(xì)胞以及組織水平實(shí)驗(yàn)的完整檢測體系。

我們可提供從樣本運(yùn)輸、儲存管理、樣本制備、樣本檢測到檢測數(shù)據(jù)分析的全流程服務(wù)。憑借嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理流程、標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)室操作、原始數(shù)據(jù)儲存體系以及實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目管理系統(tǒng),已經(jīng)為超過3000家客戶單位提供服務(wù),年檢測樣本超過100萬,受到了廣大客戶的信任與支持。


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發(fā)布者:上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司
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