結(jié)核。═B)作為全球重大健康挑戰(zhàn),傳統(tǒng)診斷工具始終面臨 “痛點(diǎn)”—— 干擾素釋放試驗(yàn)(IGRAs)僅靠單一細(xì)胞因子(IFNγ)檢測,既難區(qū)分潛伏感染(TBI)與活動(dòng)性疾。═BD),又易漏診近期感染等高風(fēng)險(xiǎn)人群。
近期《Journal of Clinical Microbiology》發(fā)表的一項(xiàng)重磅研究,為 TB 診斷帶來了破局新思路 —— 瑞典卡羅林斯卡醫(yī)學(xué)院(Karolinska Institutet,因每年負(fù)責(zé)評(píng)選并頒發(fā)諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)而聞名全球的醫(yī)學(xué)院)團(tuán)隊(duì)與 Mabtech 深度合作,依托 Mabtech EYRA 儀器(EYRA共聚焦多因子檢測系統(tǒng))與Mabtech全新一代ELISpot& FluoroSpot讀板儀,開發(fā)出多重 FluoroSpot 檢測方案,一舉實(shí)現(xiàn)了 TB 診斷的精準(zhǔn)化和 階段化突破,讓看不見的免疫反應(yīng),變成了能指導(dǎo)臨床的清晰信號(hào)。
一次檢測,搞定 “三重信號(hào)”:從 “單一判斷” 到 “多維分析”
傳統(tǒng) TB 免疫診斷的核心局限,在于 “只看一個(gè)指標(biāo)”——IGRA 僅檢測 IFNγ,無法捕捉免疫反應(yīng)的完整圖景。而文中這套方案的關(guān)鍵,使用FluoroSpot 檢測方案進(jìn)行多重檢測:Mabtech IRIS2 讀板儀憑借專屬 RAWspot 算法,能精準(zhǔn)識(shí)別 PBMC 細(xì)胞分泌的 IFNγ、IL-2、TNF-α 三種細(xì)胞因子,不僅計(jì)數(shù)斑點(diǎn)形成單位(SFU)(圖1和4),還能通過相對(duì)斑點(diǎn)體積(RSV)實(shí)現(xiàn)半定量分析(圖2) —— 簡單說,它不僅知道 “有多少細(xì)胞在反應(yīng)”,還能判斷 “每個(gè)細(xì)胞分泌了多少細(xì)胞因子”。

圖1:IFNγ-ELISpot和FluoroSpot檢測結(jié)果顯示,使用ESAT-6、CFP-10和EspC刺激后,斑點(diǎn)形成單位(SfU)的檢測結(jié)果高度一致。

圖2:細(xì)胞因子的生成量與細(xì)胞因子組合、結(jié)核分枝桿菌感染狀態(tài)以及結(jié)核分枝桿菌暴露時(shí)間相關(guān)
后續(xù)研究團(tuán)隊(duì)通過使用Mabtech多因子EYRAplex檢測方案配合 EYRA 儀器同步分析上清液中的細(xì)胞因子水平(圖3),形成 “細(xì)胞功能 + 分泌量” 的雙重驗(yàn)證。

圖3:結(jié)核分枝桿菌肽刺激后,斑點(diǎn)數(shù)量和RSV與培養(yǎng)上清液中的細(xì)胞因子濃度相關(guān)
研究數(shù)據(jù)最有說服力:檢測 “三重陽性細(xì)胞(IFNγ/IL-2/TNF-α)” 時(shí),這套組合的特異性直接拉滿 ——26 例 IGRA 陰性對(duì)照者中無 1 例假陽性,受試者工作特征曲線下面積(AUROC)高達(dá) 0.93,遠(yuǎn)超單一 IFNγ 檢測的 0.90(圖4);即便與經(jīng)典 ELISpot 對(duì)比,其 IFNγ 檢測結(jié)果的相關(guān)性也達(dá)到 0.87(P<0.001)(圖1),既保證了精準(zhǔn)度,又兼容了臨床習(xí)慣。

圖4:基于IFNγ/IL-2/TNF-α的“三重陽性細(xì)胞” 與 “總 IFNγ” 的SFUs檢測的診斷性能評(píng)估。
不僅能診斷,還能 “分期”:幫醫(yī)生鎖定 “高風(fēng)險(xiǎn)者”
對(duì) TB 防控而言,“區(qū)分感染階段” 比 “單純確診” 更重要 —— 近期感染者進(jìn)展為活動(dòng)性疾病的風(fēng)險(xiǎn),遠(yuǎn)高于遠(yuǎn)期感染者。而研究團(tuán)隊(duì)這套方案,恰好能捕捉這種 “階段差異”:研究發(fā)現(xiàn),近期感染(暴露 <6 個(gè)月)者的 IL-2/TNF-α 細(xì)胞占比更高,IFNγ 反應(yīng)較弱;而活動(dòng)性疾病患者則以 IFNγ/TNF-α 細(xì)胞為主;遠(yuǎn)期感染者(>24 個(gè)月)的三重陽性細(xì)胞比例會(huì)逐漸升高。這種清晰的 “細(xì)胞因子圖譜”,讓醫(yī)生能一眼識(shí)別 “誰是近期感染者”“誰已發(fā)展為疾病”,精準(zhǔn)分配預(yù)防性治療資源,避免 “一刀切”。

圖5:通過細(xì)胞因子分泌模式,區(qū)分 TB 感染階段與其他病原體反應(yīng)
對(duì)免疫抑制人群(如 HIV 感染者、接受激素治療者)而言,這套方案的價(jià)值更突出 —— 傳統(tǒng) IGRA 常因 T 細(xì)胞數(shù)量不足漏診,而 FluoroSpot的多重檢測能捕捉到 “非 IFNγ 信號(hào)”(如 IL-2/TNF-α),哪怕 IFNγ 未達(dá)閾值,也能提示感染,大大降低漏診風(fēng)險(xiǎn)。
如今,全球都在向 “2035 終結(jié) TB” 的目標(biāo)沖刺,而精準(zhǔn)診斷正是這場戰(zhàn)役的 “前哨”。Mabtech EYRA 儀器與讀板儀,用 “多重檢測” 打破了傳統(tǒng)診斷的局限,讓我們能更清晰地看清 TB 的 “免疫密碼”—— 對(duì)醫(yī)生,它是精準(zhǔn)判斷的 “利器”;對(duì)患者,它是避免過度治療或漏診的 “保障”;對(duì)全球 TB 防控,它則是推動(dòng) “早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)” 的關(guān)鍵力量。
產(chǎn)品介紹
1. EYRA共聚焦多因子分析儀
產(chǎn)品亮點(diǎn):
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共聚焦成像技術(shù),獲取高清beads圖像
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非液流系統(tǒng),免預(yù)熱、免清洗、無堵塞風(fēng)險(xiǎn)
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一鍵讀板,無需校準(zhǔn)、調(diào)焦和調(diào)曝光
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Opal™軟件實(shí)現(xiàn)采集分析一體化,精準(zhǔn)采集、自動(dòng)分析,結(jié)果立現(xiàn)
產(chǎn)品詳細(xì)信息:http://zfnb.cn/show1equip.asp?equipid=5337970
2. Mabtech ELISpot&FluoroSpot&FociSpot讀板儀
產(chǎn)品亮點(diǎn):
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科學(xué)的數(shù)據(jù)處理RAWspot技術(shù)
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特有的RSV斑點(diǎn)信號(hào)三維體積
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可執(zhí)行IQOQPQ認(rèn)證
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數(shù)據(jù)客觀穩(wěn)定
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符合CE認(rèn)證/CFR21 Part11技術(shù)規(guī)范
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符合質(zhì)量管理體系
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應(yīng)用ELISpot/FluoroSpot/FociSpot實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品詳細(xì)信息:http://zfnb.cn/show1equip.asp?equipid=3490216