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細胞因子檢測常用方法合集速遞

瀏覽次數(shù):171 發(fā)布日期:2025-11-28  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負

細胞因子(cytokine,CK)是由免疫細胞(單核細胞、巨噬細胞、T/B 細胞、NK 細胞等)與非免疫細胞(內(nèi)皮細胞、表皮細胞、成纖維細胞等)合成分泌的小分子蛋白質(zhì),具備廣泛生物學活性。其通過結(jié)合特異性受體,調(diào)控細胞生長分化、免疫應(yīng)答等關(guān)鍵過程,通常由免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導產(chǎn)生,功能涵蓋固有免疫與適應(yīng)性免疫調(diào)節(jié)、血細胞生成、APSC 多能細胞調(diào)控及損傷組織修復(fù)等。依據(jù)功能特性,細胞因子可劃分為白細胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長因子等多個家族,是維持人體穩(wěn)態(tài)、抵御疾病的核心調(diào)節(jié)分子。

在臨床場景中,細胞因子檢測可廣泛應(yīng)用于疾病輔助診斷與預(yù)后評估、感染源鑒別、細胞因子風暴預(yù)警、腫瘤免疫機制研究、自身免疫性疾病病情監(jiān)測及藥效評估,同時能實時追蹤放化療、免疫治療或術(shù)后的炎癥進展、轉(zhuǎn)歸及治療效果;在生物藥研發(fā)領(lǐng)域,該檢測可助力免疫原性評估、藥物活性檢測、藥物相互作用研究及安全性評價等核心環(huán)節(jié)。
 
可見,細胞因子檢測是生物醫(yī)藥領(lǐng)域不可或缺的關(guān)鍵技術(shù),對疾病診斷治療、藥物研發(fā)創(chuàng)新均具有重要支撐意義。目前科研人員已開發(fā)多種檢測方法,以下為常用技術(shù)匯總:
 
1、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA,Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)
作為免疫學檢測領(lǐng)域的經(jīng)典技術(shù),ELISA 專為體液中細胞因子等微量蛋白質(zhì)檢測設(shè)計,核心原理是將抗原 / 抗體固定于固相載體并保留其免疫活性,通過酶標記抗原 / 抗體的特異性結(jié)合反應(yīng),最終以顯色信號定量目標分子。該技術(shù)兼具高靈敏度、強特異性、操作便捷及可自動化優(yōu)勢,不僅能精準檢測細胞因子的含量、亞型與受體表達,還可支撐細胞因子分泌機制及功能研究,同時適用于核酸、脂質(zhì)等其他生物分子檢測,廣泛應(yīng)用于臨床診斷、生物藥研發(fā)、食品安全等多個領(lǐng)域。
    
2、酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)(ELISPOT,Enzyme-linked ImmunoSpot)
作為 ELISA 技術(shù)的進階升級方案,ELISPOT 是聚焦單個分泌細胞的定量檢測核心技術(shù) —— 依托免疫吸附與細胞培養(yǎng)技術(shù)融合,將目標細胞接種于包被特異性抗體的 96 孔板,經(jīng)刺激后細胞分泌的細胞因子或免疫球蛋白會被原位捕獲;移除細胞后,通過生物素標記二抗、酶標親和素孵育及底物顯色,單個分泌細胞會形成特征性染色斑點,實現(xiàn)可視化定量。
該技術(shù)兼具超高靈敏度、操作便捷、成本可控等優(yōu)勢,不僅能精準檢測單個細胞分泌細胞因子 / 免疫球蛋白的頻率,動態(tài)監(jiān)測樣本中活細胞免疫狀態(tài),還可對於抗原刺激后的活細胞進行功能性驗證,憑借特異性強、結(jié)果直觀可信的核心特點,廣泛應(yīng)用于分泌細胞因子細胞檢測、抗體分泌細胞(ASC)測定等場景,成為國內(nèi)外免疫學界公認的核心檢測技術(shù)之一。
 
     

3、蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot,WB)
作為蛋白分析領(lǐng)域的經(jīng)典常規(guī)技術(shù),WB 專為細胞 / 組織中特定蛋白質(zhì)表達檢測設(shè)計,核心原理是將樣品經(jīng)凝膠電泳分離后轉(zhuǎn)印至固相膜,通過特異性抗體與目標蛋白的免疫結(jié)合反應(yīng),結(jié)合顯色或化學發(fā)光檢測,依據(jù)條帶位置與灰度值,實現(xiàn)蛋白的定性鑒定及半定量分析。
該技術(shù)流程清晰(含電泳分離、轉(zhuǎn)膜、免疫印跡、顯色等關(guān)鍵步驟),兼具高分辨率與強特異性優(yōu)勢,可同時對比多個樣品中同種蛋白的表達量差異,廣泛應(yīng)用于基因蛋白水平表達研究、抗體活性檢測、疾病早期診斷等生物醫(yī)藥研究及臨床相關(guān)場景。
 
4、超敏電化學發(fā)光技術(shù)(MSD,Meso Scale Discovery)
作為生物分子檢測領(lǐng)域的超高靈敏度技術(shù),MSD 以電化學發(fā)光為核心原理 —— 通過電化學信號激發(fā)特異性標記物產(chǎn)生強光信號,結(jié)合信號放大機制實現(xiàn)對低濃度目標分子的精準捕獲,尤其適用于生物標志物等微量生物分子檢測。
 
該技術(shù)兼具高靈敏度、寬線性范圍、強特異性及低背景干擾等核心優(yōu)勢,更支持多靶點并行檢測,能高效實現(xiàn)低豐度目標分子的定量分析,在生物標志物篩查、藥物高通量篩選及免疫分析等場景中表現(xiàn)突出。目前已廣泛應(yīng)用于臨床診斷與生物醫(yī)藥研究:臨床端可精準檢測腫瘤、感染性疾病、心血管疾病等標志物,為診療決策提供可靠依據(jù);研發(fā)端可支撐生物分子互作研究、新藥活性評價及免疫學機制解析,為新藥研發(fā)與基礎(chǔ)科研提供關(guān)鍵技術(shù)支撐。
 
5、Luminex 液相芯片檢測技術(shù)
作為多因子檢測領(lǐng)域的核心技術(shù),Luminex 融合微球編碼與流式細胞儀原理,通過微球內(nèi)部三種免疫熒光的不同配比,可實現(xiàn)數(shù)百種特異性微球的精準區(qū)分,每種微球均能靶向捕獲一種目標蛋白。檢測時,儀器通過雙激光系統(tǒng)完成定性與定量分析:635nm 紅色激光識別微球編碼,明確對應(yīng)靶標類型;532nm 綠色激光檢測 PE 熒光基團信號強度,精準反映靶標蛋白結(jié)合量。
該技術(shù)兼具多重檢測優(yōu)勢與超高靈敏度,既實現(xiàn) pg 級絕對定量(性能媲美多重 ELISA),又支持單次實驗同時檢測多種蛋白指標,大幅提升檢測效率與樣本利用率。配套試劑盒覆蓋人類、非人靈長類、小鼠、大鼠、犬、豬等多個物種,廣泛適用于多因子聯(lián)合檢測、生物標志物篩查、藥物研發(fā)等生物醫(yī)藥研究場景。
   
6、Olink 技術(shù)
作為突破蛋白檢測多重性、特異性與靈敏度瓶頸的核心平臺,Olink 聚焦超靈敏多重蛋白標志物檢測、無偏靶向蛋白質(zhì)組學及精準蛋白組學三大核心方向,通過技術(shù)創(chuàng)新推動蛋白標志物發(fā)現(xiàn)、藥物研發(fā)、轉(zhuǎn)化醫(yī)學研究及多組學整合的落地應(yīng)用。
 
該平臺檢測服務(wù)兼具高靈敏度、強穩(wěn)定性與高準確性優(yōu)勢,配套超微量蛋白標志物開發(fā)、蛋白互作分析等多元化方案,可適配精準醫(yī)療、轉(zhuǎn)化醫(yī)學、藥物研發(fā)等廣泛研究場景。同時,其在生物標志物篩查、疾病預(yù)測診斷等領(lǐng)域的應(yīng)用,為臨床診療決策與科研創(chuàng)新提供高效技術(shù)支撐,加速醫(yī)學研究向臨床轉(zhuǎn)化的進程。
 
7、Cytometric Bead Array(CBA)系統(tǒng)
作為流式細胞術(shù)與蛋白定量技術(shù)的融合創(chuàng)新,CBA 系統(tǒng)是針對微量樣本設(shè)計的多指標檢測技術(shù),核心原理是利用微米級熒光編碼微球 —— 每種微球偶聯(lián)特異性抗體,與樣本中目標細胞因子 / 蛋白質(zhì)結(jié)合形成免疫復(fù)合物,經(jīng)洗滌去除未結(jié)合成分后,通過流式細胞儀實現(xiàn)精準檢測。
該技術(shù)兼具多重檢測與高效分析優(yōu)勢:單次實驗可同步定量單個樣本中多種指標,且具備高靈敏度、強特異性特點,同時操作快速簡便、檢測通量高,成為免疫學研究與臨床診斷的關(guān)鍵工具。臨床端可精準檢測免疫性疾病、感染性疾病、腫瘤等疾病標志物,支撐早期診斷、病情監(jiān)測及療效評估;研發(fā)端可助力細胞因子表達規(guī)律、分子互作機制及疾病關(guān)聯(lián)研究,為新藥研發(fā)與免疫學基礎(chǔ)研究提供可靠數(shù)據(jù)支撐。
 
8、質(zhì)譜法(Mass Spectrometry,MS)
作為蛋白分析領(lǐng)域的高分辨率技術(shù),MS 通過質(zhì)譜儀精準測量離子質(zhì)荷比,可直接獲取細胞因子的分子量、氨基酸序列等核心信息。其核心優(yōu)勢在于兼具超高靈敏度、強特異性與高分辨率,既能實現(xiàn)低濃度細胞因子的精準檢出,又能有效區(qū)分不同細胞因子的結(jié)構(gòu)差異,為蛋白鑒定與特性分析提供直接依據(jù)。
   
綜上,細胞因子檢測是貫穿生物醫(yī)藥領(lǐng)域的關(guān)鍵技術(shù)支撐,廣泛賦能疾病診斷監(jiān)測、治療預(yù)后評估、藥物研發(fā)篩選、疫苗設(shè)計評估及基礎(chǔ)機制研究等核心場景。伴隨檢測技術(shù)的持續(xù)迭代與應(yīng)用場景的不斷拓展,細胞因子檢測必將在未來生物醫(yī)藥領(lǐng)域中發(fā)揮更為核心的引領(lǐng)作用。
 
細胞因子檢測服務(wù)哪個公司提供?
細胞因子檢測選樂備實(LabEx)!提供 ELISA、ELISPOT、MSD、Luminex、Olink、CBA等多種核心技術(shù),覆蓋多維度細胞因子檢測需求,助力科研與臨床轉(zhuǎn)化!
小鼠炎癥10因子Panel LXLBM10-1 10 IL-1 β/IL-1F2,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6 ,IL-10,IL-12p70,CXCL1/GRO/α/KC/CINC-1,IFN-γ,TNF-α
人炎癥10因子Panel LXMH10-1 10 IFN-γ,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12p70,IL-13,TNF-α

樂備實是國內(nèi)專注于提供高質(zhì)量蛋白檢測以及組學分析服務(wù)的實驗服務(wù)專家,自2018年成立以來,樂備實不斷尋求突破,公司的服務(wù)技術(shù)平臺已擴展到單細胞測序、空間多組學、流式檢測、超敏電化學發(fā)光、Luminex多因子檢測、抗體芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫組化、DSP空間多組學等30多個,建立起了一套涵蓋基因、蛋白、細胞以及組織水平實驗的完整檢測體系。
發(fā)布者:上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司
聯(lián)系電話:15921930842
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標簽: 細胞因子 ELISA WB
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