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顯微鏡應(yīng)用:在熒光顯微鏡成像中推進(jìn)和擴(kuò)展光譜范圍

瀏覽次數(shù):118 發(fā)布日期:2025-11-26  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
2024.01月由 Photonics Media 主辦主題為“在熒光顯微鏡成像中推進(jìn)和擴(kuò)展光譜范圍”網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)。
 
 
 
在本視頻中,Dr. Holst將分享我們使用索尼傳感器制造的 pco.pixelfly 1.3 SWIR 相機(jī)的關(guān)鍵特性,包括其廣泛的靈敏度和長時(shí)間曝光的能力。此外,他還將討論科學(xué)級(jí)CMOS (sCMOS)相機(jī)和 InGaAs 傳感器在讀出噪聲方面的不同表現(xiàn),并展示了一些實(shí)驗(yàn)結(jié)果,如量子效率值和線性曲線等。Dr. Holst還將介紹該相機(jī)在多光譜成像、體內(nèi)和活體顯微鏡檢查等方面的潛在應(yīng)用,并演示了使用該相機(jī)和免費(fèi)軟件進(jìn)行多光譜數(shù)據(jù)分析的示例。
 
相機(jī)由USB連接供電,并支持軟件和API,下圖可見,相機(jī)能能夠檢測到的索尼傳感器的絕對(duì)量子效率值,在整個(gè)范圍內(nèi)展現(xiàn)了較高的靈敏度。
 

 
但在顯微鏡應(yīng)用中,如果使用科學(xué)級(jí)CMOS相機(jī)和傳感器,那么InGaAs(銦鎵砷)傳感器的讀出噪聲特性就大為不同,因?yàn)樵贑MOS領(lǐng)域,需要參考比較的是1.3~1.8個(gè)電子,或0.8或0.5個(gè)電子的讀出噪聲,在InGaAs領(lǐng)域我們參考的是180~200個(gè)電子。這意味著獲得適當(dāng)?shù)膱D像,需要更多的光線,見下圖兩個(gè)典型的測量光子傳輸曲線圖例,也可用于推導(dǎo)(光電)轉(zhuǎn)換因子:
 

 
體內(nèi)和活體顯微鏡應(yīng)用:

 
在這里看到近紅外背光照明的小鼠頭骨圖像(圖一),可以看到血液系統(tǒng)使用的ICG的發(fā)射光,如果將圖像與SWIR圖像(圖二)進(jìn)行比較,您可能會(huì)注意到血管更多,圖像對(duì)比度也更好。
 
(圖一)
 
(圖二)
 
由于散射和吸收較抵,可以用它來觀察動(dòng)物而無需切割打開它們,下圖可以觀察從1000nm~1600nm不同波長范圍內(nèi)所獲得的圖像下方的圖表信號(hào)減少,因?yàn)樵?450nm水對(duì)光的吸收率最高,而組織中存在大量水分,另一方面增加的是對(duì)比度,因?yàn)樗猩傻墓庾由⑸浔仨毧朔L的路徑,因此被系收的概率更高。因此,相機(jī)主要檢測到的是直接從組織發(fā)射或離開的光,提供了更好的對(duì)比度。
 

 
 
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