《細胞探險隊》旅程更新!繼T(Jurkat、CTLL-2、MT-4、HuT-78)、B(Raji、Daudi、Ramos、DB)淋巴細胞系、單核-巨噬細胞系(Raw264.7、THP1、MH-S、J774A.1)的培養(yǎng)合集后,這次探索的是NK細胞系!緊跟《細胞探險隊》,開啟細胞培養(yǎng)的奇妙之旅:覆蓋上百種細胞系,積累干貨經(jīng)驗和技巧,讓細胞培養(yǎng)不再難!各位童鞋,如果有想要了解的細胞系或者遇到哪些問題,也歡迎留言~
NK-92
1. 名稱:NK-92(人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞)
2. 別稱:NK92、Natural Killer-92、NK-92.05、Neukoplast、aNK12
3. 簡介:NK-92是從一名50歲男性非霍奇金淋巴瘤患者的外周血單核細胞中分離并建立,經(jīng)EB病毒(EBV)轉(zhuǎn)染誘導永生化,從而形成持續(xù)增殖的NK細胞系。
4. 種屬:人
5. 組織來源:外周血
6. 生長特性:懸浮細胞
7. 應用:腫瘤免疫治療研究;CAR-NK開發(fā);藥物篩選;臨床前研究等。
8. 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣

圖片來源于ATCC
9. 培養(yǎng)條件:
(1)完全培養(yǎng)基配方:MEMα(SH30265.01)+12.5%FBS(SV30208.02)+100-200 U/ml IL-2(UA040057-50μg)+1%雙抗(SV30010)
(2)溫度:37°C
(3)CO2:5%CO2
10. 換液頻率:2-3次/周,可通過補充新鮮培養(yǎng)基(半量換液)或者離心換液兩種方式進行換液
11. 傳代周期: 當細胞密度達到1-2*10^6/mL可進行傳代
12. 傳代比例:1:2-1:3
13. 凍存液配方:90%完全培養(yǎng)基+10%DMSO(abs9187-100mL)或商品化細胞凍存液(130-129-552)
14. 注意事項:
(1)培養(yǎng)基中必須持續(xù)補充IL-2(濃度≥100 U/mL),否則細胞48小時內(nèi)死亡;
(2)NK-92輕度聚集為正,F(xiàn)象,但大面積結(jié)塊可能提示狀態(tài)不佳,可輕柔吹打(避免劇烈震蕩或過濾)或降低細胞密度(高密度易加劇聚集)來減輕結(jié)塊現(xiàn)象;
(3)避免過度離心:離心速度≤300×g。
NK-92MI
1. 名稱:NK-92MI (人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞)
2. 別稱:NK-92 MI、NK-92 mi、NK92-MI
3. 簡介:NK-92MI細胞是轉(zhuǎn)染得到的源自NK-92細胞的IL-2非依賴的NK細胞株。
4. 種屬:人
5. 組織來源:外周血
6. 生長特性:懸浮細胞
7. 應用:三維細胞培養(yǎng);免疫學。
8. 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣

圖片來源于ATCC
9. 培養(yǎng)條件:
a) (1)完全培養(yǎng)基配方:MEMα(SH30265.01)+12.5%FBS(SV30208.02)+12.5%馬血清(abs989)+0.2mM Inositol(abs816057)+0.1mM β-巰基乙醇(abs9592-100mL)+0.02mM Folic Acid(abs812845)+1%雙抗(SV30010)
(2)溫度:37°C
(3)CO2:5%CO2
10. 換液頻率:2-3次/周,可通過補充新鮮培養(yǎng)基(半量換液)或者離心換液兩種方式進行換液
11. 傳代周期:當細胞密度達到1*10^6個/mL時進行傳代,維持細胞密度2-3*10^5個/Ml
12. 傳代比例:1:3
13. 凍存液配方:90%FBS+10%DMSO(abs9187-100mL)或商品化細胞凍存液(130-129-552)
14. 注意事項:
(1)細胞偏圓或偏橢圓,透亮,成團生長。只有成團的細胞有增殖活性,單個的細胞基本沒有增殖活力;
(2)細胞剛復蘇或密度較低時,可以先把培養(yǎng)瓶立起來,促進細胞聚團。當細胞正常聚團后,可以將培養(yǎng)瓶平放培養(yǎng)細胞,以增大空氣交換面積;
(3)傳代時可將大的細胞團輕輕吹散成小團,但是不要吹散成單個細胞(單個細胞基本沒有增殖活力)。
YT
1. 名稱:YT(人NK細胞白血病細胞)
2. 別稱:YT-0
3. 簡介:YT細胞是從人NK細胞白血病患者的外周血中分離出的自然殺傷(NK)細胞系,具有快速增殖特性。
4. 種屬:人
5. 組織來源:外周血
6. 生長特性:懸浮細胞
7. 應用:NK細胞功能;免疫治療;血液腫瘤研究。
8. 細胞形態(tài):巨噬細胞樣

圖片來源于網(wǎng)絡
9. 培養(yǎng)條件:
(1)完全培養(yǎng)基配方:RPMI-1640(SH30809.01)+10%FBS(SV30208.02)+1%雙抗(SV30010)
(2)溫度:37°C
(3)CO2:5%CO2
10. 換液頻率:2-3次/周,可通過補充新鮮培養(yǎng)基(半量換液)或者離心換液兩種方式進行換液
11. 傳代比例:1:2-1:3
12. 凍存液配方:55% RPMI-1640+40%FBS+5%DMSO(abs9187-100mL)或商品化細胞凍存液(130-129-552)
13. 注意事項:
(1)細胞易聚集成團,傳代前可輕輕吹打分散;
(2)若添加IL-2,需定期更換培養(yǎng)基以維持細胞活性。
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